In order to purify the soybean-derived hypoglycemic peptides, ultrafiltration,732 cation exchange chromatography, SephadexG-25 gel chromatography were used prepared   with   ultrasonic   assisted   enzymolysis。   After   the   SephadexG-25    gel

chromatography process, the C-Ⅲ-2 was gained, which was the most active   peptides

in hydrolysis。 After LC-MS analysis, the sequence of the soybean-derived hypoglycemic peptides  which has the highest  α-glycosidase inhibitory activity    and

content in C-Ⅲ-2 was as follows: Ala-Ile、Ala-Leu、Met-Glu、Phe-Gly-Gly、Ser-His。

The results of peptides (MW< 5000Da) on alloxan hyperglycemia model mice tests shown that the peptide dose 288 mg/kg had an obvious hyperglycemic effect，

soybean-derived hypoglycemic peptides could reduce post-meal blood glucose remarkably。

Keywords:  soybean-derived hypoglycemic peptides; process optimization; spectroscopy analysis; ultrasonic pretreatment; isolation and purification

目录 

第 1 章  绪论  错误!未定义书签。 

1。1 糖尿病概述 。 1 

1。1。1 糖尿病定义  1 

1。1。2 糖尿病分类  1 

1。1。3 糖尿病的预防与治疗 。 2 

1。2 生物活性多肽 。。 2 

1。2。1 活性肽概述  2 

1。2。2 酶法制备功能性短肽 。 3 

1。3 降血糖肽的研究进展 。。 3 

1。3。1 植物来源降血糖肽  3 

1。3。2 动物来源降血糖多肽 。 5 

1。3。3 其他降血糖多肽 。。 5 

1。4 超声波技术及在酶解反应中的应用 。。 6 

1。4。1 超声技术原理及特点 。 6 

1。4。2 超声波技术在酶解反应中的应用  6 

1。5 蛋白质分子构象的研究方法 。。 8 

1。5。1 荧光光谱法  8 

1。5。2 激光拉曼光谱法 。。 8 

1。5。3 圆二色性光谱法 。。 9 

1。5。4 傅里叶变换红外光谱法 。。 9 

1。6 本研究主要内容 。。 10 

1。7 主要技术路线 。 11 

第 2 章  实验材料与方法 。 12 

2。1 材料、试剂和仪器 12 

2。1。1 材料与试剂 。。 12 

2。1。2 实验仪器 。 12 

2。2 实验方法 。。 13 

2。2。1 鼠源性 α-葡萄糖苷酶制备与 PNPG 溶液配制  13 

2。2。2 检测方法 。 13 

2。2。3 大豆蛋白水解酶筛选方法 。。 14 

2。2。4 超声波辅助酶法与传统酶法的酶解效果比较 。 15 

2。2。5 超声波辅助酶法制备大豆降血糖肽单因素试验 。。 15 

2。2。6 响应面法优化超声波辅助酶法制备大豆降血糖肽试验 。。 15 

2。2。7 超滤分离大豆降糖肽  15 

2。2。8 732 型阳离子交换树脂分离纯化大豆降糖肽 。 16 

2。2。9 Sephadex G-25 凝胶分离纯化大豆降糖肽  17 

2。2。10 反相高效液相色谱质谱联用分析 。 18 

2。2。11 荧光光谱的测定  18 

2。2。12 红外光谱  18 

2。2。13 拉曼光谱  19 

2。2。14 大豆降血糖肽对四氧嘧啶型糖尿病小鼠的影响 。 19 

第 3 章  结果与分析  21 

3。1 紫外吸收差法测定多肽浓度标准曲线 。。 21