Keyword: lung cancer; chiral intermediates; co-immobilized; lipase-inorganic hybrid nanoflower; synergistic catalysis 

目   录

摘   要 2

目   录 4

1. 前言 6

1.1 克唑替尼 6

1.1.1 克唑替尼的出现 6

1.1.2 克唑替尼的合成 7

1.2 手性醇的合成进展 8

1.2.1 手性醇的化学合成法 8

1.2.2 手性醇的生物催化法 8

1.3 克唑替尼关键手性中间体 9

1.3.1手性中间体的合成进展 10

1.3.2手性中间体的创新合成 11

1.4新型有机－无机杂化纳米花 12

1.4.1新型有机-无机杂化纳米花的合成研究 12

1.4.2新型有机-无机杂化纳米花的展望 13

2. 主要研究内容 13

3. 实验部分 14

3.1实验仪器与材料 14

3.1.1实验仪器 14

3.1.2实验试剂 15

3.1.3实验原料 15

3.1.4 Luria-Bertani培养基（LB培养基）的配制 16

3.1.5 缓冲液的配制 16

3.1.6 蛋白质电泳电板缓冲液的配制 16

3.1.7 低浓度咪唑及高浓度咪唑的配制 16

3.2实验步骤 16

3.2.1 感受态的制备 16

3.2.2 DNA转化 17

3.2.3 挑菌接种 17

3.2.4 提取质粒 18

3.2.5重组质粒目的片段的验证 18

3.2.6 菌种保存 18

3.2.7 诱导 19

3.2.8 离心破壁 19

3.2.9 蛋白质电泳检测 19

3.2.10 纯化 20

3.2.11 透析 20

3.2.12 酶活性的测定 21

3.2.13 酶晶体（酶-无机杂化纳米花）的制备 21

3.2.14游离酶催化反应 21

3.2.15 双酶偶联催化反应 21

3.3 实验结果与讨论 22

3.3.1 重组质粒的验证 22

3.3.2 酶蛋白的SDS-PAGE检测 22

3.3.3 酶-无机杂化纳米花（hNFs）的扫描电子显微镜（SEM） 23

3.3.4 酶晶体与游离酶的热稳定性的对比 23

3.3.5 酶晶体催化和游离酶催化的对比 25

3.3.6 酶晶体和游离酶在不同温度下催化产率的结果对比 25