裸眼检测水中的汞离子(2)
实验部分
1. 仪器与试剂
1.1 主要仪器
双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司 TU-1901）
磁力加热搅拌器（上海浦东光学仪器 79-1型）
透射电镜（徐州医学院）
1.2 主要试剂
2-巯基丁酸（MSA C6H4O4S 东京化成工业株式会社 AR）
三水合柠檬酸三钠（国药集团化学试剂有限公司 AR）
氯金酸（上海试剂厂）
DNA序列（上海生工合成）
2. 实验步骤
2.1合成金纳米粒子
2.1.1 金纳米种子的合成
将50 mL 2.5×10-4 M HAuCl4溶液搅拌加热至沸腾后一次性全部加入1.75 mL 1%(wt/v)三水合柠檬酸三钠溶液，待颜色变为酒红色，继续搅拌沸腾30 min，冷却至室温。
2.1.2 金纳米颗粒的生长
取50 mL的锥形瓶，加入0.8 mL 5×10-3 M HAuCl4溶液,再加入上述制备的金种子溶液0.12 mL后将溶液稀释至50 ml，在搅拌的条件下，一次加入0.24 mL 0.01 M的2-巯基丁二酸溶液，快速搅拌一小时后，冷藏备用。
2.2样品的制备
分别将10 nM 的DNA序列1（—GCCTTTCTGA—SH）和DNA序列2（—CGGTTTGACT—SH）与0.02 nmol/L的金纳米粒子混合，超声5 min，相应的得到探针1和探针2的溶液。
空白：将25 µL的探针1和探针2以及1 µL的水混合制的空白。
样品：将25 µL的探针1和25 µL的探针2以及1 µL 50 nM的Hg2+混合制得探针的混合液。
结果与讨论
1．实验结果
本实验是通过利用DNA序列1（—GCCTTTCTGA—SH）和DNA序列2（—CGGTTTGACT—SH）上的巯基与金纳米粒子的特异性高亲和性制成探针1和探针2。在没有Hg2+存在时，这两个探针上的部分互补碱基会实现配对，但两个探针不会完全杂交。但在Hg2+存在的条件下，由于形成了T–Hg2+–T的配位化学键，这两个DNA-AuNps探针会实现完全杂交，从而引起金纳米粒子的聚集。由于金纳米粒子的聚集将会使溶液颜色发生改变或使得溶液中有大颗粒沉淀生成而造成溶液LSPR强度发生变化，这样就会为实现裸眼检测Hg2+提供依据。本实验就是基于这样的原理来进行