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甘氨酸亚铁中游离甘氨酸含量测定方法的研究(2)
(1)甘氨酸亚铁饲喂怀孕后期及泌乳期母猪,可提高母猪的繁殖性能,提高仔猪出生重、存活率、断奶窝重及生长速度。
(2)提高并文持血红素的正常状态,能防治仔猪贫血症、提高免疫力,抑制胃肠道内的大肠杆菌,减少下痢、腹泻。
(3)提高肌红蛋白水平,改善胴体品质,使仔猪皮毛光亮、仔鸡鸡冠透红,肉质鲜红。
(4)改善禽蛋品质,减少破蛋率,加深蛋壳蛋黄色泽,减少应激,降低饲料消耗。
(5)对水产动物抗应激,减少疾病发生,促进生长。
(6)具有明显促进机体生长,提高血清红细胞原卟啉含量和肝组织中铁含量的作用,能缓解微量元素之间吸收时的拮抗。
(7)用于铁强化剂,其不改变
食品
的原色和风,是生产强化铁食品的理想食品营养强化剂。
1.2甘氨酸亚铁中游离甘氨酸测试方法的
研究现状
1.3茚三酮分光光度法检测游离氨基酸
1.3.1甘氨酸及茚三酮的理化常数
1.3.1.1甘氨酸
甘氨酸是一种白色结晶或结晶性粉末。甜。溶于水,微溶于吡啶,不溶于乙醚。其线性分子式为NH2CH2COOH,分子量为75.07,相对密度为1.595,熔点为182 ℃,沸点为233 ℃[8]。
1.3.1.2茚三酮
茚三酮别名苯并戊三酮是一种近似为白色结晶,或浅黄色结晶粉末,微溶于乙醚及三氯甲烷,100 ℃以上变为红色。其分子式为C9H4O3,分子量为160.13,CAS RN为485-47-2,熔点为251 ℃,密度为0.86。图1.1是水合茚三酮的结构式[9]。
图1.1
茚三酮(2,2-二羟基二氢化茚-1,3-二酮)是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。当与这些游离胺反应时,能够产生深蓝色或者紫色的物质,叫做Ruhemann紫。茚三酮常用来检测指纹,这是由于指纹表面所蜕落的蛋白质和肽中含有的赖氨酸残基,其上的一级胺被茚三酮检测。在室条件下,它是一种白色的固体物质,溶于乙醇和丙酮。茚三酮可以看作是是二氢茚-1,2,3-三酮的水合物[10]。
羰基的碳原子带有部分正电荷,如果其连接的邻位基团具有吸
电子
能力(比如羰基本身)那么羰基碳的正电荷会进一步加强。因此1,2,3-三羰基化合物的中心碳原子比简单的酮具有更强的亲电性[11]。因此二氢化茚-1,2,3-三酮易于跟亲核试剂发生反应,比如水。然而对于大多数的羰基化合物,羰基的形式比与水结合产物的形式更加稳定,之所以茚三酮能形成中心碳原子的稳定水合物是由于其邻位的羰基基团的去稳定化作用。需要注意的是:为了产生茚三酮发色团,胺需与一分子的茚三酮缩合产生席夫碱(Schiff base)。只有氨与一级胺能够经过这一步骤。在这一步中必须存在一个α质子用于席夫碱转移,所以如果胺邻接的碳是三级碳原子,就不能被茚三酮所检测。茚三酮与二级胺的反应产生亚胺盐([R1R2C=NR3R4]+ ),亚胺盐也具有颜色,一般呈现橘黄色[12]。
1.3.2茚三酮分光光度法检测游离氨基酸的反应机理
茚三酮分光光度法也是一种常用的检测基酸含量的方法,其反应机理如下:
2,2-二羟基-1,3-茚三酮与氨基酸、肽类或蛋白质的自由α氨基或其他氨基化合物所产生的一种可定量的显色反应。所呈现的颜色随反应的条件(酸度、温度、盐浓度、铜、镉离子等)不同而异。用于氨基酸和肽的层析及定量测定。在加热条件下,氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色(与脯氨酸或羟脯氨酸反应生成(亮)黄色)化合物的反应。此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,在570 nm波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量,也可以在分离氨基酸时作为显色剂对氨基酸进行定性或定量分析。在法医学上,使用茚三酮反应可采集嫌疑犯在犯罪现场留下来的指纹。因为手汗中含有多种氨基酸,遇茚三酮后起显色反应[13]。
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