1.5 杭白菊提取工艺优化

目前杭白菊活性物质的浸提工艺日益优化，目前，已有报道对杭白菊药材及提取物中的单一或多种成分进行定量分析，袁学勤[12]，李丽华[13]等利用高效液相色谱对菊花中某一成分进行测定，对其化学成分的研究主要集中在挥发油和黄酮类物质的提取和分析。HPLC 法可以对各个黄酮组分进行定性定量分析，但需要标准化合物，然而有时难以获得相应的黄酮标准品；HPLC－MS和HPLC－MS/MS 可在没有标准化合物的情况下通过分析待测物分子量和质谱碎裂信息对黄酮组分进行定性鉴定，尤其是当 MS 为高分辨质谱时，可直接获得待测物和碎片离子的元素组成，从而大大提高定性鉴定的准确率[14]。

本研究拟以杭白菊为材料，用乙醇对杭白菊浸提，乙醇浸提杭白菊中的活性物质；杭白菊花中活性物质的高效液相色谱分析通过摸索液质联用仪条件对杭白菊定性分析，杭白菊花与叶的样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用每个保留时间所对应那个成分。

1.6 杭白菊研究现状

    菊花品种繁多，产地也很多。随着研究的深入，在测定杭白菊活性成分方面越来越多。文献报道菊花中黄酮类化合物的分析鉴定主要采用紫外可见分光光度法、 高效液相色谱法 （HPLC）和高效液相色谱－质谱联用法 （HPLC －MS）。分光光度法主要用于测定菊花中的总黄酮含量，不能用于分析鉴定各个黄酮组分；HPLC 法可以对各个黄酮组分进行定性定量分析，但需要标准化合物，然而有时难以获得相应的黄酮标准品；HPLC－MS 和 HPLC － MS/MS 可在没有标准化合物的情况下通过分析待测物分子量和质谱碎裂信息对黄酮组分进行定性鉴定，尤其是当 MS 为高分辨质谱时，可直接获得待测物和碎片离子的元素组成， 从而大大提高定性鉴定的准确率。James M. Harnly[15]等人采用液相分离质谱检测的方式，采用标准化比对系统的确定了菊花中63中分类化合物。但是，目前尚无我省道地产区杭白菊中有效成分的全面分析数据。