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早期灌喂母源粪菌对新生仔猪肠道菌群发育的影响(3)
(4)用灭过菌的纱布快速过滤去除匀浆后所得粪样悬浊液中的大颗粒物质。
(5)将过滤后所得的浑浊液体以2000 r/min的速率离心10 min,取上层即为菌液。
(6)在菌液中加入体积分数为10%的无菌甘油,分装小管后-80℃备用。
1.2.2 粪菌干预试验
选取一窝14头仔猪,出生后,随机分为2组,粪菌处理组和对照组。粪菌组仔猪出生后1-5天每天灌喂粪菌接种液(接种量逐渐增大,前三天2 mL/天,后两天3 mL/天),对照组灌喂等量的生理盐水。第3天仔猪与母猪分离,采用人工乳饲喂仔猪,14天后添加乳猪配合饲料。
1.2.3 仔猪粪样采集
于仔猪出生后第1,3,5,7,10,14,18,22天采集每只仔猪的粪样,并在仔猪出生后第19,20,21,23,26天收集母猪粪样,冰盒保存转运至实验室,-20℃保存,以备用于提取菌群DNA。
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