(4)二水氯化钙（CaCl2·2H2O)  1mL/L  2.5g /100mL dH2O

(5)磷酸二氢钾（KH2PO4）  1mL/L 17.5g/100mL KH2PO4  dH2O

(6) 氯化钠（NaCl）  1mL/L 2.5g/100mL  

(7)六水合三氯化铁 （FeCl3·6H2O）  1mL/L 0.05g/100mL  dH2O

(8)1mL/L EDTA-Fe

1NHCl:取4.1mL浓盐酸用蒸馏水稀释至50mL

1NEDTA-Na2称取0.9306g溶解至50mL蒸馏水中

称取FeCl3· 6H2O 0.901g溶于10mL以上步骤已经配制完成的1NHCl中，然后与10mL已经配制完成的0.1NEDTA-Na2混合，再加入蒸馏过滤后的土壤浸出液40mL,最后加入蒸馏水稀释至1000mL。

2.3 实验方法

2.3.1 小球藻的分离

    用洁净灭菌的塑料瓶取淮师镜月湖湖水水样进行显微镜观察，如果发现小球藻数量较多时，就可以立即进行分离；如果小球藻数量较少，分离比较困难时，可以进行预培养数天，等到数量较多时在进行分离。来`自^吹冰论*文-网www.chuibin.com

    本次实验采用水滴分离法:用微吸管吸取经稀释适度的淮师镜月湖湖水水样,按一定的距离滴在消过毒的载玻片上,在显微镜下进行一一查看,直到一个水滴中只显示一个小球藻细胞(细胞形态特征与已知的小球藻图片进行比照)，用培养液将玻片上装有小球藻细胞的水滴冲入装有灭菌的培养液试管或小三角瓶中［19］。摇匀后放入人工气候箱内进行增殖培养5天。

2.3.2 小球藻的培养

本实验主要研究不同pH，温度，光照强度对小球藻培养的影响，根据具体情况选出每个因素三个不同水平进行实验，因此可选用3水平表，选用L9（34）最合适，并且有1个空列，可以用来估算实验误差，以衡量实验的可靠性。实验过程中不考虑交互作用，所以因素可以占任意列。