常温高压处理对藻蓝蛋白蛋白性质的影响(6)
细胞氧化状态 SOD，NO，NOS等
细胞功能 氧化伤害 利用荧光探针测定氧化应激状态
丙二醛
1.4.1 MTT比色法测定细胞存活率
MTT比色法是被用来检测细胞生长情况的一种常用方法，检测原理是外源性MTT被细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原为水不溶性蓝紫色结晶甲瓒，还原后的物质会沉积在细胞中，死细胞并不能起到这样的作用。细胞中的甲瓒被二甲基亚砜溶解后，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定吸光值，这种方法可以间接反映细胞的数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
1.5 本课题的研究目的与研究内容
随着生物学、医学、海洋药物学等学科的发展，藻蓝蛋白的生物活性已成为人们关注的热点。肿瘤的发生、辐射致癌、心血管疾病、药物中毒、人体衰老等过程都涉及到自由基和活性氧，直接影响人体的健康，藻蓝蛋白的抗氧化活性可抑制或减少这些疾病的发生，引起医疗保健作用。藻蓝蛋白绿色、天然、健康的特性和在食品、医药、化妆品等领域的广泛应用，使其具有广阔的市场前景[11]。
食品中抗氧化物在疾病预防中的作用已经被大量的研究，但是体外抗氧化评价不具有通用和可靠性，体内抗氧化的机理仍不明确，很难确定抗氧化物在预防疾病中的具体作用，仍需进行更多的实验来确定在进行抗氧化评价时的选择作用。细胞抗氧化实验反映了抗氧化物质在细胞内的吸收、代谢和分布等方面，比化学抗氧化方法更具有生物相关性，能更好地预测物质在体内的抗氧化活性，目前被广泛用于果蔬等食物细胞抗氧化活性的评价。细胞抗氧化实验在评估其他各种抗氧化剂、具有抗氧化活性的食物和膳食补充剂上具有广阔的应用前景。
本实验从藻蓝蛋白的抗氧化性、乳化性、稳定性、起泡性以及影响其稳定性因素这几个方面进行高压前后的对比试验研究。本次实验通过不同压力，不同时间，选取适合激发藻蓝蛋白的活性的压力和时间，进行抗氧化性、蛋白质性质的分析，在一定程度上扩大了藻蓝蛋白的利用价值，充分利用这一天然食物为人们带来健康。本实验选用高压后的藻蓝蛋白，加入培养的MGC-803胃癌细胞，进行生物性的抗氧化活性评价。