车前多糖提取及其在软饮料中应用的研究(3)
车前子具有降血糖、降血脂作用。Van Rosendaal[14]等让高胆固醇病人服用大量的欧车前子后发现，欧车前子结合肠腔内的胆汁酸，能降低血清胆固醇，预防冠心病。Anderson J．W.[15]等试验发现，欧车前子能降低总胆固醇及低密度脂蛋白含量。
车前子具有利尿、明目作用。车前子可使人及犬、兔等动物的水分排出量增加，并增加尿素、尿酸及氯化钠的排除[16]。同时研究表明车前子能不同程度地提高晶状体抗氧化能力，并抑制晶状体上皮细胞凋亡的作用[17]。李文明[18]等报道，车前子具有明显降低眼压作用，从而起到明目之功效。
综上所述，车前子具有多种药理活性，可用于治疗多种疾病。因此，对车前子展开各种研究在多方面都具有一定的意义。
1.3 多糖提取技术的研究
1.3.1 溶剂浸提法
多糖的提取一般采用热水、酸、碱、乙醇等作为溶剂，并且多数采用热水浸提法进行粗提。以乙醇浸提法为例，工艺流程为：乙醇浸泡→过滤挥干→沸水浴回流→离心分离→过滤→重复提取→真空浓缩→冷藏过夜→离心分离→溶剂洗涤→冷冻干燥→得粗多糖；粗多糖→溶解→Sevage法除蛋白→透析→真空浓缩→冷藏过夜→离心分离→溶剂洗涤→冷冻干燥→得精制多糖。
工艺操作要点如下：
粗多糖
(1)乙醇浸泡：称取干燥的车前子加8倍量体积分数80％乙醇浸泡1ｄ。选取不同浓度的乙醇，对车前子进行浸泡。
(2)沸水浴回流：以料液比1：10沸水浴回流提取3h。选取不同的料液比进行沸水浴回流提取。
(3)离心分离：以4000r/min的速度，持续10min进行离心。
(4)过滤、浓缩：过滤，滤渣重复提取一次，合并滤液。再将澄清液于60℃左右下用真空浓缩法进行浓缩，以防止多糖的热降解，浓缩为原体积的五分之一。
(5)冷藏过夜：加95%乙醇至醇浓度达到80%后在4℃下冷藏过夜。
(6)溶剂洗涤：离心分离所得沉淀用等量的无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤两次。
(7)冷冻干燥：能排除95-99%以上的水分，使干燥后产品能长期保存而不变质，且能保持原来的结构，复水性好。
精制多糖
(1)Sevage法除蛋白：正丁醇、氯仿混合溶液(正丁醇：氯仿=1：4或1：5)和样物提取液混合并且振荡，不需要加热，利用离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬。
(2)透析：用流动自来水透析48h，蒸馏水透析24h。
1.3.2 酶法
酶法是通过酶反应将原料组织分解，加速有效成分的释放和提取，选择适宜条件将影响提取的杂质分解去除，促进某些极性低的脂溶性成分转化成糖苷类易溶于水的成分，降低提取的难度。由于酶具有专一性和选择性的特点，应用时多采用复合酶[19]。
1.3.3 超声辅助提取法
超声的机械化学作用通过破坏细胞壁和加强细胞内的传质作用，提高了植物中有机化合物的提取速度[20]。超声波在液体内传播时，液体介质不断受到压缩和拉伸，在拉力作用下，液体断裂形成暂时的近似真空的空洞，压缩时，这些空洞就会发生崩溃，出现局部高温以及放电现象，产生空化作用[21]。
陈建[22]等人运用超声技术提取车前子多糖，工艺流程为：粉碎车前子→超声提取→离心分离(4800rpm，10min)→挤压过滤→过滤滤渣→合并滤液→离心分离(4800rpm，10min)→浓缩→加入乙醇→低温(4℃)静置→离心分离(4800rpm，10min)→有机溶剂洗涤→干燥→得粗制多糖。此实验得出的超声提取车前子多糖的最佳工艺条件为：超声时间80min，超声温度40℃，固液比1：120，提取率可达13.01％。