1．4  蓝莓花色苷提取液的制备

蓝莓花色苷提取液的制备参照Buran等[8]的方法稍作修改。冷冻的蓝莓在室温下放置12 h解冻，用打浆机将其碾碎，然后混合以1%的HCl，再将混合溶液用超声波细胞粉碎机在25 ℃和500 W/L 的条件下处理30 min得到悬浮液，通过8层纱布过滤取上清液，上清液进一步于5000 rpm离心15 min制得蓝莓花色苷提取液，存放在-18 ℃待使用。

1．5 超声辅助吸附过程

在100 mL锥形瓶中添加50 mL蓝莓花色苷提取液，再加500 mg的活化后树脂。然后将锥型瓶置于目标温度（20 ℃和30 ℃）下的恒温水浴系统中。将超声波探头插入烧瓶中，使其在分散液中深度为20 mm，以促进大孔树脂的吸附。分别在超声处理0, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270和300 min后取1 mL样品，然后离心。此外，用量热法测定了吸附系统中的超声强度。

吸附量和吸附率如下定义：

Qe=(C0-Ce)×Vi/W

Qre=(C0-Ce)/C0×100%

其中，C0和Ce是蓝莓花色苷提取液的初始和平衡浓度（mg / L）。Vi代表蓝莓花色苷提取液用量（mL）。W是所用树脂的干重（g）。Qe是吸附量（mg / g干树脂）和Qre是平衡是的吸附率（%）。

1．6  震荡辅助吸附过程

为了与超声形成对比以探究超声波对大孔树脂吸附蓝莓花色苷的效果，用摇床震荡辅助大孔树脂纯化蓝莓花色苷。在100 mL锥形瓶中添加50 mL蓝莓花色苷提取液，再加500 mg干重的活化树脂。将摇床设置为20 ℃，100 rpm，然后将锥型瓶置于摇床中震荡，6 h后取1 mL样品，然后离心收集上清液。

1．7  超声辅助解吸过程

    用Whatman滤纸（4级，Waterman Co.,Ltd）收集吸附了花色苷的大孔树脂，然后将载有花色苷的树脂（500 mg湿重）用去离子水洗净，加入含50 mL 80%乙醇水溶液的100 mL的锥形瓶中[11,13]，再将其放入水浴，超声探头插入的位置与吸附实验相同，对溶剂中花色苷含量的周期性变化（0, 10, 20, 30, 40, 50和60 min）进行监测。

解吸量和回收率如下定义：

Qd=Cd×Vd/W 

D=Cd×Vd/(C0-Ce)/Vi×100% 

R=Cd×Vd/C0/V0×100% 

其中Cd是解吸液中的花色苷浓度（mg / L）。Vd表示解吸液（mL）的体积。Qd是解吸量（mg / L），D是解吸率（%），R是解吸平衡的回收率（%）。

1．8  理化分析

1．8．1  总花色苷含量的测定

    总花色苷含量用Ivanova等[15]提出的方法确定。样品用乙醇/水/盐酸= 69 / 30 / 1（V/V/V）溶液稀释，在540 nm处的测定其吸光度（比色皿中的1 cm的光路）。总花色苷含量使用以下公式计算：

总花色苷含量=A540nm×16.7×d

其中A540nm是540 nm处的吸光度，d 是稀释因子；总花色苷含量以mg/L为单位表达为锦葵色素-3-葡萄糖苷当量。

1．8．2 可滴定酸和总糖含量的测定

    分别根据Mohideen 等[16]和Gong等[17]的方法对蓝莓花色苷提取液中可滴定酸、总糖含量进行测定。可滴定酸含量的测定通过取5 mL蓝莓花色苷提取液，与45 mL蒸馏水混合到100 mL烧杯中，稀释样品用0.1 M NaOH滴定至pH 8.2，记录所消耗的NaOH溶液的体积。然后计算总酸含量：

总酸含量= 0.1×M×VNaOH/ Va

其中M是柠檬酸的摩尔浓度，VNaOH是所用NaOH体积（L），Va是蓝莓提取液的体积（L）。结果以每升蓝莓花色苷提取液所含柠檬酸克数当量表示。

采用硫酸-蒽酮比色法测定总糖含量，结果以每升蓝莓花色苷提取液所含葡萄糖克数当量表示。

1．8．3  有机酸和糖类