超声超高压以及高压均质技术对肌原纤维蛋白热诱导凝胶特性及分子特性的影响(5)
C0=A/e×D
C0:总巯基的摩尔浓度（mol/g）；A412:412nm处的吸光度；D:稀释倍数；e:分子吸光系数13600L/(mol•cm)
1.3.12 表面疏水性测定
表面疏水性的测定依据Hayakawa等[14]的方法，用1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS）作为荧光探针进行测定。使用磷酸缓冲液（0.6 M KCl、20 mM K2HPO4、20 mM KH2PO4、pH 6.5）将蛋白样品稀释到2mg/mL，取4mL样液先于25°C下保存5min，再冰浴10min。加入20μL 1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS，15mM），在25°C避光反应20min。选择激发波长为375nm，发射波长为440～600nm测定荧光强度，取同一浓度未加荧光探针的蛋白质溶液的荧光强度为空白，以蛋白质质量浓度（mg/mL）为横坐标，荧光强度为纵坐标，表面疏水性为拟合曲线的斜率。每个处理重复3次，取3次测量的平均值作为测定结果。
2 结果分析
采用SPSS统计分析软件对测定指标进行单因素方差（One-way ANOVA）分析，使用Duncan法进行多重比较，差异性显著建立在P＜0.05水平。