超高效液相色谱法同时测定鸡肉中氟喹诺酮类和磺胺类药物残留(2)
现有的氟喹诺酮类药物和磺胺类检测法主要有酵联免疫法和免疫受体法、液相色谱法、液相色谱质谱法[4]等，酵联免疫法和免疫受体法为快速检测法，对试剂选择性高，在一定程度上对结构较类似的化合物易出现交叉反应，结果有出现假阳性的机率[5]，液相色谱法检测时间长、流动相溶剂使用量大，液相色谱质谱联用法仪器较为昂贵。本文采用超高效液相色谱法同时检测两类兽药残留，分析速度快、节省溶剂、峰形良好、检出限低。
现国家标准中已有液相色谱法或液相色谱串联质谱法单独检测氟喹诺酮类或磺胺类药物，但样品的前处理操作方法较为繁琐，且无法同时检测出这两类药物，所以制定出快速、准确、高效，能够同时测定动物性食品中这两类药物的残留检测方法尤为必要[6]。本实验采用超高效液相色谱法建立能用于同时检测动物性食品中氟喹诺酮类药物和磺胺类残留的方法。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1试验材料
供试材料为市售鲜牛肉，购于南京市苏果超市。
盐酸环丙沙星（ciprofloxacin，CIP）、恩诺沙星（enrofloxacin，ENR）、沙拉沙星（sarafloxacin，SAR）、磺胺噻唑（sulfathiazole，ST）、磺胺二甲基嘧啶（sulfamethazine，SM2）、磺胺间甲氧嘧啶（sulfamonomethoxine，SMM）、磺胺甲恶唑（sulfamonomethoxine，SMZ）、磺胺二甲氧哒嗪（sulfamethoxazole，SDM）购于德国Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈、甲醇（色谱纯）购于美国Fisher公司；甲酸购于美国ACS恩科化学公司；磷酸氢二钾（K2HPO4•3H2O）购于上海安普生物科技有限公司；磷酸二氢钾（KH2PO4）购于国药集团化学试剂有限公司； MCX 固相萃取柱购于美国 Waters 公司；advance EDI 纯水仪系统购于德国Sartorius公司；MCX 固相萃取柱购于美国Waters 公司。
Waters Aqulity H-Class超高效液相色谱仪（配有PDA、FLR检测器）购于美国Waters公司；N-EVAP 24管氮吹仪购于美国Organomation公司；D-16C高速离心机、CPA224S电子天平购于德国Sartorius公司。
1.1.2标准溶液及提取液的配制
单标储备液的配制：5种磺胺和3种氟喹诺酮各准确称取10.0 mg标准品，甲醇溶解，定容到10.00 mL容量瓶中，配置成浓度为1.00 mg/mL的标准储备液。
混合标准液的配制：分别准确移取8种单标储备液并用甲醇定容，混合标准液中5
种磺胺浓度为10.0 µg/mL，3种氟喹诺酮浓度为1.00 µg/mL。