新型纤维素酶的筛选和表达 (3)
1.1.3 酶及生化试剂
（1）抗生素：氨苄青霉素（Ampicillin）和氯霉素（Chloramphenicol）购自生工生物工程有限公司。
（2）生化试剂：胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂粉、琼脂糖、七叶苷、柠檬酸铁铵、乙醇、考马斯亮蓝 （R-250）、盐酸、氢氧化钠、冰乙酸、咪唑及其它试剂均为国产分析纯，购自南京寿德实验器材有限公司。三羟甲基氨甲烷（Tris-base）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）、十二烷基硫酸钠（SDS）、 TEMED、过硫酸铵、30%丙烯酰胺、均购自国药集团。
（3）质粒提取试剂盒、琼脂糖凝胶回收试剂盒，购自于天根有限公司；、改良型Bradford法蛋白浓度测定试剂盒购自生工生物工程有限公司；
（4）连接酶T4 Ligase，内切酶Sau3AI、BamHI、NdeⅠ、XhoⅠ等，购自赛默飞世尔科技有限公司
（5）DNA marker，购自捷瑞生物工程有限公司
1.1.4菌株和载体
亚克隆菌株:E.coli EPI100-T1R
亚克隆载体:pWEB-TNC (本实验室去磷酸化保存)
克隆载体：pTG-19Tvector
表达载体：pET-30a(+) 由本实验室课题组经双酶切、去磷酸化处理后保存。
表达宿主：E.coli BL21 (DE3)
1.1.5 实验仪器
精密天平：FA2004N型（上海民桥精密科学仪器有限公司立式压力蒸汽灭菌锅）：LDZM-40KOS（上海申安医疗器械厂）；实验室水纯化系统：Master-SUV型（上海和泰有限公司）；电热恒温培养箱：DNP-9162型（上海精宏实验设备有限公司）；洁净工作台：8w-CJ-IFD型（广州益智仁电子科技有限责任公司）；离心机：1-14型（Sartorius AG），CT15RT高速冷冻离心机（上海天美公司）；摇床：HYG-C型（太仓实验设备厂）；电泳系统：稳压稳流电泳仪DYY-6C（北京吹冰一仪器厂）；凝胶成像系统：Gelx1520（上海欧翔科学仪器有限公司）；电击仪：micro pluser电击仪（Bio Rad公司）；梯度 PCR 仪：Hema 9600（珠海黑马医学仪器有限公司）；−80 °C 超低温冰箱WUF-400（DAHAN科学仪器有限公司）；细胞破碎仪（上海思伯明公司VCX750 Sonics细胞破碎仪）。