茶籽蛋白的提取及体外抗氧化活性研究(3)
吴元锋等[7]采用碱法从新鲜茶叶和干茶叶中提取茶叶蛋白，对提取的两种蛋白的功能性质进行了初步研究。研究结果表明，从干茶叶中提取的蛋白吸油性、凝胶性比从新鲜茶叶提取的蛋白效果好，而溶解性、吸水性、乳化稳定性、起泡性及起泡稳定性则不如从新鲜茶叶中提取的蛋白质。
靳伟刚等 [8]采用酶法水解茶叶蛋白并对其工艺进行了优化，研究结果表明，酶法水解茶叶蛋白的最佳酶解工艺条件为：酶添加量2.0%，底物浓度10.0%，pH 9.0，酶解温度50℃，酶解时间4 h；在此条件下，水解度达到74.0%，且水解产物中含有大量的小分子蛋白质和多肽，其中多肽含量可达到40.85%。
靳伟刚等[9]对茶渣中茶叶蛋白的酶水解产物即茶叶蛋白多肽的功能性质进行了研究，研究结果表明，制备的茶叶蛋白多肽具有很强的抗氧化活性，且在较低浓度下，清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的能力最高分别可达到99%、100%、97%。茶叶蛋白多肽对亚硝酸根离子也有很强的清除效果，其IC50为0.2 mg/mL，清除率最高可达到100%。此外，茶叶蛋白多肽还具有很好的抗凝血作用，当其质量浓度为3.0 mg/mL时，抗凝血作用明显优于抗凝剂柠檬酸钠。
活泼等[10]以高血脂症大鼠为试验对象，研究了非水溶性茶叶蛋白的降血脂作用。试验结果表明，非水溶性茶籽蛋白能明显降低高血脂症大鼠的高血脂症状。
张新昌[11]等采用氨基酸比值系数法和模糊识别法对茶籽蛋白进行营养价值评价。研究结果表明，茶籽蛋白含有17种人体所需的氨基酸，其中8种是人体必需氨基酸，种类较为齐全；必需氨基酸占全部氨基酸的25. 98%，第一限制性氨基酸是苏氨酸，第二限制性氨基酸是异亮氨酸; 氨基酸比值系数分别是20和36，贴近度为0. 767；色氨酸含量非常丰富，是标准模式的2. 27倍。
张超等[12]使用酶法进行苦荞麦蛋白质提取实验.实验结果证明，使用碱性蛋白酶提取效果最好，最佳的工艺条件是温度35℃、酶的用量为50U/g、pH11、反应30min、料水比1∶12，迅速灭酶，在pH为4.2的溶液中进行沉淀，去离子水洗，再经喷雾干燥即可得到苦荞麦蛋白质固体粉末，蛋白质的提取率为76%，其固体粉末的蛋白质含量为68%。
孙英等[13]经超声波预处理酶解制备抗氧化肽，利用体外化学模型评价茶籽粕多肽的抗氧化活性和功能性质。研究结果显示，超声波预处理茶籽粕蛋白后再经过酶解，酶解产物的还原力吸光值由0.384提高到0.566，后经正交实验优化得到最佳工艺参数为：超声功率720W，超声温度60℃，超声时间 40min。将在上述条件下处理的茶籽粕蛋白用胰蛋白酶酶解，酶解条件为底物浓度3%，时间2.5h，温度45℃，加酶量0.6%，pH 8.0，得到抗氧化肽的还原力吸光值为0.823，多肽得率38.73%。
沈杨扬[14]根据油茶籽粕蛋白的性质选定较少研究的阳离子型表面活性剂DTAC构建反胶束萃取体系，并设计正交实验。研究结果表明，DTAC体系前萃油茶籽粕蛋白的最佳工艺为：DTAC浓度0.06g/mL、样品加入量0.010g/mL、w0值35、萃取时间30min、KCl浓度0.20mol/L、温度35℃、增溶水pH7.0，此时油茶籽粕蛋白的前萃率达88.28%。
李旭等[15]分析了茶籽蛋白及其超滤组分（≥10ku和﹤10ku）的化学组成与功能特性。结果表明：茶籽蛋白和其超滤组分（≥10ku和﹤10ku）的蛋白质量分数分别为85.7%、89.3%和84.2%，其中还含有少量的多糖、多酚及皂苷。
1.2 蛋白质的提取方法
蛋白质是生命活动的基本物质，生命的本质在于以蛋白质为中心不断的新陈代谢。它不仅仅是对营养的补充，还提供丰富的功能特性。在食品的加工过程中，蛋白质的功能性质以及营养价值会发生一定的变化，从而对食品的品质产生一定的影响[16]。对茶籽抗氧化酶解产物进行研究，首先要获得茶籽蛋白。由于组成蛋白质的氨基酸种类繁多，且氨基酸序列组成不同，使得不同蛋白质表现出不同的理化性质。因此，蛋白质提取方法需根据其特性，选用适宜的溶剂和提取方法。目前文献报道的蛋白质提取方法主要有超声波萃取法、酶法提取、水溶液提取法、双水相萃取法和反胶团萃取法等。
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