茶籽蛋白的提取及体外抗氧化活性研究(4)
1.2.1 水溶液提取法
稀盐或缓冲体系的水溶液是常用的溶剂，被用来提取蛋白质，用水溶液提取对提取的蛋白质稳定性较好，其溶解度也较好。通常情况下，偏酸性的提取液用来提取碱性蛋白质，偏碱性的提取液用来提取酸性蛋白质。
吴晓红[17]用蒸馏水从脱脂松仁中提取水溶性蛋白，采用响应面优化方法对提取工艺进行优化，试验结果表明，在料液比1:32.3，提取时间98.2 min，提取温度36.9℃的条件下，脱脂松仁水溶性蛋白提取率达到83.60%。
郑亚军[18]等利用磷酸盐缓冲溶液从椰子中提取分离蛋白，采用正交试验对提取工艺进行优化，结果表明，在料液比1:20，pH 9.5，提取温度35℃，提取时间120 min的最佳工艺参数条件下，椰子分离蛋白的提取率达到76.60%。
1.2.2 酶法提取法
目前利用酶法提取植物蛋白质一般采用蛋白酶。蛋白酶自身种类很多，不同蛋白酶作用机理也不同。使用蛋白酶水解蛋白，对底物要求具有特异性，同一种蛋白酶作用于不同底物，得到的酶解产物不同。按照蛋白酶作用方式的不同，蛋白酶分为外切蛋白酶和内切蛋白酶。外切蛋白酶作用机理是从蛋白质肽键的任意一端切下一个单位氨基酸残基；而内切蛋白酶作用机理是在多肽链的内部破坏肽键，工业上主要使用内切蛋白酶。外切蛋白酶和内切蛋白酶对底物的作用方式不同，对蛋白的提取会产生不同影响。与传统的碱法提取蛋白质相比，酶法提取具有时间短、反应条件温和、且不会产生有害物质，在工业上具有节约能源，对反应设备要求低，降低生产成本等优点。
Anshrullah[19]、Sengupta等人[20] 分别采用酶法提取米糟蛋白、米渣蛋白、大米浓缩蛋白，试验结果表明，提取的蛋白安全无毒，可以用作食品添加剂。
1.2.3 超声波萃取法
虽然超声波的研究已经应用了很多年，但是真正实现从实验室到工业化生产还是在最近十年间。超声波作用机理是利用超声波波动破坏细胞，使细胞中蛋白质能够更好的溶出。超声波作用是物理过程，作用过程中无化学反应且溶出的物质性质不被破坏。该方法不仅能提高蛋白质的提取效率，而且可减小溶剂的使用，缩短提取时间。
目前，超声波萃取法主要应用于植物性蛋白的提取。Moulton等[21]利用超声波萃取法提取大豆蛋白。试验结果表明，超声波萃取法对大豆蛋白提取率比水提法高23%，提取相同数量蛋白比传统分批提取法节约30%的能量。黄纪念[22]用超声波萃取法对芝麻蛋白进行提取，试验结果表明，芝麻蛋白提取率可以达到83.38%。
1.3 本课题的研究目的和意义
1.3.1 研究目的
本文以茶籽粕为原料，采用碱液提取茶籽蛋白且对提取工艺进行优化，得到茶籽粗蛋白并测定其抗氧化作用。具体研究内容如下：
（1） 碱提取液提取茶籽蛋白工艺研究
研究料液比、提取液碱浓度、提取温度以及提取时间4个因素对提取茶籽蛋白的影响，以茶籽蛋白提取率作为评价指标，分别做单因素试验及响应面试验，确定最佳碱法提取茶籽蛋白工艺。
（2） 茶籽蛋白体外抗氧化活性的研究
茶籽蛋白体外抗氧化活性的研究主要研究了茶籽蛋白对DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基清除效果。
1.3.2 研究意义
我国现有茶园近200万公顷，有充足的茶籽资源。若按茶籽产量525千克每公顷计算，我国每年潜在茶籽资源超过100万吨。目前，对茶籽的研究主要集中在茶籽油、茶皂素、茶籽粕、淀粉和茶籽壳的生物活性功能上，而对茶籽蛋白研究不多，且主要停留在茶籽蛋白提取的研究，对茶籽蛋白酶解产物制备及功能特性的研究则更少。茶籽粕是茶籽油生产加工的副产品，通常用作农业生产的有机肥料。茶籽粕中蛋白质含量约为15%左右，蛋白质中含人体必需氨基酸。茶籽粕蛋白具有很高的经济价值，可将其生产蛋白饮料、冲调食品、焙烤食品的蛋白质强化剂以及作为酱油等发酵产品的蛋白原料。因此，开展从茶籽粕中提取茶籽蛋白的工艺研究，可为茶籽蛋白的综合利用提供新思路。此外在以后的研究中，还可以选用适当的蛋白酶对茶籽蛋白进行水解，制备出具有抗氧化活性的酶解产物，可将其开发为新型的功能性产品，丰富功能性食品中抗氧化物质的种类，促进功能性食品中抗氧化物质的发展具有重大意义。从茶籽中提取茶籽蛋白及对茶籽蛋白的进一步深加工，综合开发利用茶叶副产物，不仅能够变废为宝，还有利于茶产业的可持续发展，具有重要的现实意义。
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