腐竹中乌洛托品的测定方法研究+文献综述(4)
在酸性条件下乌洛托品分解生成甲醛和氨，氨被硫酸吸收生成硫酸铵，消化后加入过量的氢氧化钠溶液使得液体呈现碱性，加热煮沸液体，用硼酸吸收氨得到硼酸二氢铵，用硫酸标准溶液测定硫酸二氢铵，计算出乌洛托品的含量。凯氏蒸馏定氮法其平均相对偏差一般小于1%，相对误差小于2%，其检出限为7 g/L，实验需要在温度300～400 ℃[11]。
2.3.2.3 酸碱滴定法(药典)
乌洛托品在酸性条件下易分解成甲醛和氨，在溶液中加入过量的硫酸标准液，加热去除甲醛，当没有刺激性气是说明乌洛托品分解完全且甲醛全部溢出。甲基红作指示剂，氢氧化钠标准溶液滴定剩余的硫酸，得到乌洛托品的浓度[12]。实验凭借嗅觉鉴别甲醛是否消除干净存在的误差较大，不易掌握，且乌洛托品的分解产物—氨与一部分的酸反应，造成实验存在误差。
2.3.2.4 氰选择性电极法
将乌洛托品在酸性条件下分解成甲醛，运用甲醛和氰化物反应，随着氰化物的选择性电极，反应时间和在电极上所消耗的毫安数来判断乌洛托品的含量，测定1 ml约1.3%甲醛样品其误差在60～300 μg的误差，测定乌洛托品分解后的误差约在50～250 μg的误差，此方法可以用于测定乌洛托品在药物制剂的，精确度高，灵敏度好[13]。
2.3.3 直接测乌洛托品法
1.反相HPLC法
根据流动相和固定相极性不同从而导致各物质在两相间的分配不同来分离和鉴别物质。在甲醇：水=75：25为流动相，210 nm的检测波长，0.5 ml/min的流速浓度为20 μg/ml间二硝基苯为内标物的色谱条件下测得乌洛托品的保留时间为4.86 min，平均回收率为99.87%（RSD=0.35%，n=5），在5～30 μg/ml呈现良好的线性关系。实验准确性好，流动相简单易得，但实验对设备要求高，且对于组分复杂的溶液而言存在较大的干扰[14]。
2.离子电极法
离子电极法测乌洛托品是用pHS-2C型酸度计和傲乐复合电极在不同浓度的标准乌洛托品溶液测其对应的pH，得到pH与lgC呈线性关系，绘制标准曲线，测未知浓度乌洛托品的pH，求得待测溶液的浓度。实验的到其相关系数r=0.9909，适用于检测纯乌洛托品的含量[15]。
3.分光光度法
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。以CH3Cl为溶剂溶解乌洛托品，溶液在242 nm处有一小吸收峰，实验得当溶液的浓度在0.1～12.0 μg/L之间，吸光度与浓度呈良好的线性关系，其相关系数r=0.999（n=5），回收率为99.67%[16]。分光光度法操作简答，适用于医院和质检部门对纯乌洛托品的质量监控或溶液中存在的杂质在242 nm处没有吸收峰的溶液。
4.非水滴定法
非水溶液中的酸碱滴定利用溶剂对酸碱的强度影响很大，使原来在水溶液中不能滴定的某些弱酸弱碱，经选择适当溶剂，增强其酸碱性后进行滴定。马昌[17]用冰醋酸做溶剂，实验得到在1：1.5的0.2%亚甲基蓝加喹哪啶红为最适合指示剂。以高氯酸为滴定剂，变色电位（-378～-443 mv）与等当点电位基本相同，其标准偏差在0.03，适用于医院和质检部门对纯乌洛托品的质量监控。
5.气相色谱法
气相色谱法测定纯乌洛托品是由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同，即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别，达到分离效果检测。李薇[18]等以邻苯二甲酸二乙酯为内标物，气化温度为280 ℃条件下测得乌洛托品的含量。其标准偏差为0.0871，变异系数0.3452%，线性相关系数为0.9991，平均回收率为99.96%，其检测最低浓度为5 g/L，峰面积比为1.6412。此方法分离效果好，线性关系良好，简便，快速准确，是一种适用于乌洛托品原药及其系列制剂中乌洛托品的分离和分析。