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南极假丝酵母脂肪酶文献综述和参考文献
全世界都在关注着南极假丝酵母脂肪酶优良的催化性能,Novozyme 435是目前最成功的南极假丝酵母脂肪酶的固定化商品酶。Maugard和Legoy把Novozyme435催化文生素A与各类脂肪酸进行实验,使其发生转酯反应,生成的产物为文生素A酯[12]。在55℃的反应温度下,选择己烷作为溶剂,加入5%(m/V)的脂肪酶,100mmol/L文生素A和100mmol/L二甲基琥珀使其发生酸酯反应,反应时间为50h,实验结果得出文生素A的酯化率可以达到75%。32012
潘志友等人利用酿酒酵母表面展示
系统
成功地将南极假丝酵母脂肪酶展示在了酿酒酵母细胞的表面,并且利用该重组酿酒酵母菌体冻干粉为全细胞催化剂在非水相中催化己酸和乙醇合成己酸乙酯,实验获得了较好的成效[13]。己酸和乙醇作为这个反应的反应物,它们的物质的量之比为1:1.25,最后得出的产物为己酸乙酯,其最终的产率为98.0%,而且由实验结果可以得出结论:展示在酵母表面的南极假丝酵母脂肪酶拥有很好的操作稳定性,具备了固定化脂肪酶的良好特性。
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Takanori Tanino等人利用酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶全细胞在60℃的条件下催化己二酸二丁酯的合成[14]。其实验结果发现:在经过144 h的反应之后,该脂肪酶还是可以保有酯类合成时的活力。Michiko Kate等人的
研究
还发现酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶水解pNPB的比酶活力是自由酶的25倍[15]。
Ganapati D. Yadav等人利用Novozyme 435来催化合成香茅醇的月桂酸酯,30℃条件下,经过2 h的反应,最后实验所得到的转化率为53%,并且实现了100%的立体选择性[16]。Jason A. Carr 等对于Novozyme 435在转酯和水解合成槐糖苷酯衍
生物
中的立体选择性问题进行了探究与探讨,实验结果表明:只有处于末端的甲酯才能够发生转酯反应[17]。
南极假丝酵母脂肪酶的失活温度普遍认为是在50-60℃之间,它的失活温度主要是随着反应体系的pH值而改变,而Novozyme 435则可以在80-90℃下仍可以保持较好的活性。P.Borg等人将Novozyme 435在无溶剂体系中催化合成三酸甘油酯[18]。其实验结果显示:在80℃的反应温度下时可以达到最佳的优化效果,反应物是甘油、乙醇,它们的物质的量之比为1:3,只需要加入5%的酶,经过10 h的反应时间就可以得到纯净的三酸甘油酯。
在刘均洪等人对南极假丝酵母脂肪酶发酵条件优化及酶学性质进行了研究[19]。他们通过HCL1mol/L和NaOH1mol/L来调整初始的培养基的pH值,在初始pH值分别为3,4,5,5.5,6,6.5,7,7.5,在26℃的温度条件下发酵54个小时,再来测定酶的活性。实验结果表明,在pH值为6.0时,酶的活性最高,可以达到18.4U/mL。之后,再用优选后的培养基,在以上实验的基础之上进行培养,培养温度分别为20,24,26,28,30和35℃,实验结果表明,当实验温度为24℃时,细胞生长和微生物产酶均较好,酶的活性可以达到19.6U/mL。
Netto等通过共价结合的方法将CALB固定在带有特殊功能基团的磁性微粒上[20]。他们对其CALB的催化对应体的选择性转酯反应的活性进行了考察,实验结果表明,由于微粒带有磁性,所以固定化酶从反应体系当中被回收相对来说是很容易的。通过
化学
方法来制备固定化酶,虽然酶与载体的结合较牢固,但是得到的固定化酶的活性损失却相对较大。
Secundo等利用自制的不同组成(通过改变Si/AL来实现)合成的贝得石粘土,固定脂肪酶CALB和BCL[21]。实验主要考察了载体当中Al含量的改变对于固定化酶的含量的影响,其实验结果表明,在相同的固定化的条件下,CALB的固定化效果比BCL的效果要好,用实验得到的固定化酶进行转酯反应,固定化酶的催化活力随着载体中Al含量的降低而升高,但是随着吸附酶量的增加而有所降低,并且还利用H+-载体和Na+-载体来固定酶,结果表明,H+-载体得到的固定化酶的催化性能要优于Na+-载体得到的固定化酶。
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