分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活性的研究(2)
3.4.1溶液状酶活性测定 13
3.4.2凝胶状酶活性测定 14
3.4.3溶液状酶抑制率测定 15
3.4.4凝胶状酶抑制率测定 15
四 结论 17
致 谢 18
参考文献 19
分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活性的研究
一 毕业论文前言
我国有机磷农药从1993年开始禁用有机氯农药后便被广泛使用，有统计显示在1999年我国的农药产量便为49万吨。其中甲胺磷、氧乐果、甲基对硫磷、敌百虫、敌敌畏等农药由于市场的欢迎而被厂家大量生产。[1]但是大批量生产的农药包括杀虫剂，除草剂，杀菌剂，植物生长调节剂等这些都易引起中毒。事实上美国，英国，德国，法国等国家从很早就开始有计划的花大量金钱和精力进行食品中的农药（大多为有机磷和氨基甲酸酯类杀虫）残留检测来确保国民的食品安全。联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)也因为这个问题成立了食品法典委员会(CMC)，这个委员会专门负责关于农药残留指标的规定和管理，并且对各种农药的残留问题进行定期的评估。委员会会根据相关的数据和专业分析，制定出各种农药在人类饮食中的最高残留限量（MRL）[2]和每日允许摄入量（ADL）[3]。在2l世纪我国飞速发展的情况下，我国农业面对的挑战也由数量型转变为质量型，大家更加关注食物的安全健康问题。因此，相关部门必须对现有农药残留限量的国家标准（如毒死蜱、敌百虫在蔬菜上的残留标准分别为1.0 mg／kg、0.1 mg／kg）进行严格执行。伴随着地球村和WTO，农作物进出口的不断扩大也要求者我们农药残留的检测标准早日与国际接轨。现如今人类对于农药的依赖和使用已经对环境（空气，地下水，土壤，湖泊）造成了巨大污染，并且造成了一个恶性循环，农药的使用不仅杀了害虫，还对害虫的天敌也有伤害，从而加重了农作物对农药的依赖。农药的误食亦造成了一些生物灭绝的危险。所以分析检测和控制农药残留不仅能保证人类健康，还对改善生态环境有着积极的意义。[4]
1.1 农药残留给人带来的危害
我国现用有机磷农药代替了有机氯农药有好处但也有其坏处。有机磷农药优点是效率高，降解快，低生物累积，缺点是与胆碱酯酶形成不可逆的稳定的磷酰化胆碱酯酶，使磷酰化胆碱酯酶失去活性，难发挥正常作用而引起中毒。有机磷农药的长期使用在食物链中积累[5]，神经组织“乙酰胆碱脂酶”和“胆碱脂酶”活性的抑制引起一系列中毒症状，引发各种疾病从而对人体健康有害[6]。引发的各种疾病主要为以下几种：
①导致胃肠道疾病：胃肠道的消化系统褶皱较多，是个容易存藏毒素的地方。造成农药残留于此，造成恶心和腹泻等问题。
②肝脏负担的增加：肝脏负责分解有毒物质。其工作为制造酶，酶与毒素进行氧化分解从而能脱毒[7]。长期残留的农药进入无疑是加大了肝脏的工作量。就像机器一样，长时间的工作也会对肝脏造成损害。肝硬化，肝脏积水等一些病变随之而来。
③身体免疫力下降：农药随着瓜果蔬菜进入身体，有毒物质进入血液，直接损害神经元[8]，造成中枢神经死亡，身体各器官免疫力开始下降[9]。人便容易感冒、头晕、盗汗、心悸、健忘和失眠等。
④加大致癌的可能性：农药中有毒化学物质增加了细胞发生癌变的可能性。
1.2 农药残留的一些检验方法
1.2.1 色谱法
高效液相色谱法，薄层色谱法是现在主要的检测Ops的方法。其中薄层色谱法(TLC)能通过用显色剂观察斑点颜色和用比移值定性。[10]如果与其他的技术联合使用，还能对样品中被分离的成分进行定量分析。国内刘安喜等人发现甲胺磷含量可用薄层色谱法（TLC）来测定。高效液相色谱法(HPLC)是集液相色谱柱色谱法和气相色谱法的优点并再开发的能够检测克线磷的色谱法[11]。