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分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活性的研究(4)
1.3.3 全自动大量农残检验仪
全自动大量农残检验仪是酶抑制率测定法仪器的一种(分光光度法),该仪器国内的生产厂家较少,主要是国外的产品为主。由此通常售价比较昂贵,大概为18万元[21]一套,国内的每套10万[22]以上。其中的代表为台湾生产的E-MAX2型全自动大量农残检验仪。它的优点有以下几点:①试剂灵敏度比较高、检测时间短。②检测准确率最高 ,可达N80%以上是。③后期的检测样品的费用较低,只需0.1元/个。全自动大量农药残留检验仪的缺点为以下几点:①对周围环境温度和湿度有一定的要求。②该仪器使用的试剂特殊,保存条件较苛刻。③售价高、体积较大、质量大。④对操作人员技术和素质要求高。
1.4 酶抑制检验法原理
本次试验我为了测定乙酰胆碱酯酶被抑制的程度,以氯化硫代乙酰胆碱作为底物(反应物),有以下的反应:
Cl(CH3)3NCH2CH2SOCCH3 Cl(CH3)3 NCH2CH2SH + CH3COOH
生成的产物氯化硫代胆碱能与显色剂5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)生成黄色的5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)。农药加入抑制了乙酰胆碱酯酶的活性,减少了氯化硫代乙酰胆碱的分解,令生成的黄色5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)减少。可用溶液吸光度的变化值(特征波长412nm)测出乙酰胆碱酯酶的抑制率 。
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2,9-二(1-乙氧基乙氧基)10-脱乙酰基巴卡丁III的合成
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