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分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活性的研究(3)
1.2.2 有机磷农药降解酶法
OPs分子可由OPs降解酶降解,降解的过程中通过破坏有机磷的磷酯键而使农药褪去毒性。[12]水解酶有益于OPs初期的降解和解毒。氨基、芳氧基和脱烷氧基等可从酶的水解中生成。而氧化还原酶能够使硝基还原成氨基、羟基化苯环开环等,所以该方法消除农药残留的最有潜力的方法之一。OPs降解酶不仅降解效率能够比化学降解(22℃时)快一千多倍且OPs不被农药及农药制剂抑制,对环境无太多要求。
1.2.3 生物传感器
生物传感器是具有可逆性响应的装置,组成通常有两个部分—生物敏感元件和分析装置。其最大特点是对于特别种类的化学物质或者生物具有选择性。生物传感器凭借造价低、对环境要求低、高效率、体积小等优点被市场所欢迎。酶传感器、免疫传感器、微生物传感器以及液晶型化学传感器都是生物传感器的衍生产品。[13]
在制备生物传感器时,关键步骤为酶的固定化。这个步骤能决定传感器性能的优劣。现在常用的固定方法有共价键合法、聚合物包埋法、聚合物包埋法、吸附法。[14]其中最为普遍的是聚合物包埋法。天然聚合物魔芋葡甘聚糖等有优良的生物亲和性能使酶保持较高的生物活性[15],所以在用作固定酶的载体时尤受青睐。
1.2.4 速测灵法(金属离子催化显色表面皿法)
二硫代酸酯、磷酰胺、磷酸酯、能在金属离子催化下水解为磷酸与醇。[16]磷酸与显色剂反应,使紫红色褪去变成无色,通常检测灵敏度为0.18~10.0 mg•kg-1。该方法避免了酶抑制法受酶效价的影响,操作简便、快速、
经济
且不需使用仪器。但是测速灵法只能对特定农药检测。
1.2.5 酶抑制分析法
酶抑制分析法凭借快速、简便、成本低廉等优点被大肆推广,常被监督部门用于对市场上的蔬果进行实时监控。酶抑制分析法就是在酶反应试验中加入显色剂和底物通过观察颜色的变化来判断有无残留的有机磷。[17]当然还有种方法就是测定乙酰胆碱酯酶和特定的化学物质反应产生的化学或者
物理
性的变化并根据变化来判定农药的残留。酶的反应底物常见的有乙酸-5-溴-羟基吲哚、乙酸萘酯或羧酸酯、溴化或碘化硫代乙酰胆碱,靛酚乙酸酯等。
1.3 市场上常用农药残留检测仪器
1.3.1 速测卡目测法(纸片法)农药残留快速检定仪
速测卡目测法(纸片法)农药残留快速检定仪在国内生产最多,一般价格较低为2000[18]元/台。其中代表为广东省深圳市英思太科技开发有限公司生产的PR2OOOA型农药残留速测仪。[19]虽然这种仪器有许多的生产厂家和产品型号,但操作大体上是一样的。速测卡农药残留速测仪的有以下几个优点:①检测速度快、单次检测数量多。②价格便宜,总价钱在2500元左右。③体积较小、重量较轻,方便外出或户外没有电源的条件下操作。④对操作人员的技术要求不高,操作简单。同样的它的缺点是:①速测卡的价钱比较贵,一般在2元/片,检测样品的成本费用相对比较高。②检测准确性比较低,有一定的应用局限性。
1.3.2 智能化农药残留综合速测仪
智能化农药残留综合速测仪作为检测项目综合性比较强的仪器,是酶抑制率测定法仪器的一种(分光光度法),通常售价为15000[20]元/套左右。它的优势在于能同时对氨基甲酸酯类农药,有机磷农药等类似的有毒农药进行检测,而且还可以对亚硝酸盐和重金属进行检测,使用范围较广。智能化农药残留综合速测仪的优点有许多,大体有以下几点:①能快速定性检测硝酸盐和重金属含量,单个样品所需费用也较低。②体积小、重量轻、较方便携带。③检测浓度范围大、检测限度低、准确性相对高。但是它也有以下缺点:①对硝酸盐和重金属项目检测的准确性低。②检测所用试剂较特殊,试剂需冷藏保存。③对操作人员有一定要求。
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2,9-二(1-乙氧基乙氧基)10-脱乙酰基巴卡丁III的合成
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