索拉胶生物合成相关基因的敲除及功能研究(4)
LB液体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠 10g，水1000mL，pH 7.0~7.2。
Htm固体培养基：磷酸二氢钠1g，硝酸钾3g，氯化镁O．2g，无水氯化钙0．07g，氯化亚铁0．0125g，硫酸锰0．003g，氯化锌0．0075g，蔗糖20g，琼脂O．9％左右(8．O-10．0 g)，水1000 mL，pH 7．0~7．2。
Htm索拉胶发酵培养基：磷酸二氢钠1g，硝酸钾3g，氯化镁O．2g，无水氯化钙0．07g，氯化亚铁0．0125g，硫酸锰0．003g，氯化锌0．0075g，蔗糖30g，水1000 ml，pH 7．0~7．2。
注：以上培养基均是121℃灭菌20 min后使用。
试剂配方：
TAE缓冲液（50×）：Tris碱 242.2 g，EDTA 37.2 g，加入约800 mL去离子水溶解后，加入57.1mL冰醋酸，定容至 1000 mL，室温保存。
Tris-HCl缓冲液（pH 8.0,10mM）：50 mL 0.2 M的三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与适量体积的0.1 M盐酸混匀后，用pH计调整pH，定容至1000 mL。
1.0％琼脂糖：称取0.5g琼脂糖固体粉末，加入50ml TAE缓冲液（50×）,混合均匀。
安普拉霉素：用无菌去离子水配制50mg/mL的母液，4℃保存，使用浓度为50 μg/mL。
氨苄青霉素（ampicillin）：用无菌去离子水配制100mg/mL的母液，用0.22 μm的微孔滤膜过滤除菌后，4℃保存，使用浓度为100 μg/mL。
卡那霉素（（kanamycin）用无菌去离子水配制50 mg/mL的母液，4℃保存，使用浓度为50 μg/mL。
氯霉素（chloramphenicol）：用无菌去离子水配制50 mg/mL的母液，用0.22 μm的微孔滤膜过滤除菌后,-20℃保存，使用浓度为50 μg/mL。
X-Gal（20 mg/mL）：1 g X-Gal干粉溶于50 mL二甲基甲酰胺（DMF）中，小管分装，-20℃保存。
IPTG（100 mM）：1.2 g IPTG干粉溶于无菌水中，定容至50 mL，用0.22 μm滤膜过滤除菌后，小管分装，-20℃保存。
SOC培养基：胰蛋白胨20 g/L、酵母提取物5 g/L、NaCl 10 mM、KCl 2.5 mM、MgSO4 10 mM、MgCl2 10 mM、葡萄糖 20 mM。
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