凝胶卡与试管技术在不规则抗体筛查中的应用比较(4)
1990年Lapierre等人发明了检测红细胞凝集的凝胶技术 (gel techniqure)[10]，该技术很快商品化并迅速推广应用到临床输血，并产生了“凝胶试验” (gel test)的专用名词。Lapierre等人发明的凝胶技术是将6根微型管柱连接而成一张凝胶卡，管柱中含有葡聚糖凝胶颗粒、缓冲液和特异性抗体，组成一个微型红细胞过滤装置。故凝胶技术又被称为凝胶微柱技术（gel microcolumn technology）。凝胶技术最初主要用于ABO血型正、反定型，RhD等血型抗原定型。后来发展出抗人球蛋白凝胶技术[11-13] 。该技术可以用于直接抗人球蛋白试验和间接抗人球蛋白试验。后者可用于抗体筛选和鉴定抗体特异性[14-17]、ABO血型系统以外的血型检测、血型嵌合体检测[18]，以及红细胞解离抗体鉴定[19]。
在间接抗人球蛋白试管法中，体外致敏的靶红细胞必须使用生理盐水彻底洗涤，去除悬液中的血浆蛋白成份后，再加入抗人球蛋白试剂。如果洗涤不完全，残留的血浆蛋白和抗人球蛋白试剂会发生中和反应，产生假阴性结果。在抗人球蛋白凝胶技术中，体外致敏的红细胞不需要洗涤，可以直接加入抗人球蛋白试剂，节省时间和人力。在间接抗人球蛋白凝胶试验中，使用低离子强度缓冲液介质，可以缩短红细胞体外致敏时间，提高凝集反应的强度[20]。
凝胶技术的优点是需要血样量少、受检红细胞一般不需要洗涤、检测凝集反应的灵敏度高，红细胞凝集格局可以文持至少24小时，便于复读结果 。此外凝胶技术操作简便，目前已经可以全自动化操作，降低了手工操作误差。凝胶技术的弱点包括检测速度不如试管方法快，用于抗体鉴定的红细胞必须调整到所要求的浓度，受检血样中的血纤蛋白可能干扰红细胞凝集格局等。
1.4间接抗人球蛋白试验
间接抗人球蛋白用于体外检测人体血浆或血清（以下统称血浆）中是否存在IgG类型血型抗体。操作程序是以受检血者血浆作为检材，先在试管中将血浆和靶红细胞混合孵育，然后用0.9%氯化钠溶液洗涤红细胞去除血浆蛋白。再加入抗人球蛋白试剂，观察红细胞是否发生凝集反应。由于增加体外孵育致敏这道程序，故被称为间接抗人球蛋白试验。
1945年Coombs等人制备了兔抗人免疫球蛋白试剂，该试剂作为第二抗体可以和致敏红细胞表面的IgG血型抗体结合，并导致红细胞产生凝集反应。这个检测方法被称为Coombs试验（库姆氏试验）[20-21]，或抗人球蛋白试验（简称AHG）。
1.5本课题的研究意义及研究内容
1.5.1 研究意义
病人输注血液或血液制品导致的任何意外的反应常称输血反应，严格地说输血反应可以是有害的，因此输血反应可定义为任何输血前不能预期的副作用或并发症，通常是指输血的不良后果。
通过抗体筛查试验可以很好地解决输血反应带来的后果。我们可以通过抗体筛查试验来判定病人的血型中含有何种不规则抗体，并通过交叉配血判定了献血者和受血者之间的血型是否吻合。依靠凝胶卡的高灵敏度性来检测出传统试管法未能检测出的抗体。
使用试管法和凝胶卡技术同时对临床血液样本进行不规则抗体筛查。比较这两种检测方法的在检测不规则抗体过程中的异同，并对检测结果进行分析比较。
1.5.2 研究内容
间接抗人球蛋白试验检测对象是血清或血浆。红细胞血型抗体筛查，选用临床上需要输血的各种疾病患者。按照①新生儿溶血病；②同种抗体；③输血病人；④自身抗体⑤贫血⑤孕妇患者进行分类。各病例数按实际收样情况确定。上海血液中心血型检测中心是国家血型参比实验室，样本来源于全国各医疗单位。抗体筛选阳性率较高。本研究的主要研究内容包括：
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