狂犬病病毒M蛋白单克隆抗体的制备(3)
1.1.2 溶液的配制
⑴LB 液体培养基：
酵母粉 2.5g
NaCl 5g
胰蛋白胨 5g
充分溶解于500mL 蒸馏水中，放于1L锥形瓶中121℃高压灭菌30min，室温保存。
⑵PBST溶液：
向1L PBS溶液中加入1000μL Tween-20，充分溶解后，室温保存。
⑶1M IPTG溶液
将2.383g IPTG加到20mLddH2O中，待其充分溶解后，用滤器过滤除菌，1mL 每管分装，-40℃ 储存，以上步骤需在超净台中操作。
⑷考马斯亮蓝染色液
冰乙酸 100mL
甲醇 450mL
考马斯亮蓝 2.5g
去离子水 450mL
充分溶解后放置室温备用。
⑸脱色液
冰乙酸 100mL
甲醇 450mL
去离子水 450mL
充分溶解后放置室温备用。
⑹binding buffer
0.2M NaH2PO4 19mL
0.2M Na2HPO4 81mL
NaCl 29.3g
加ddH2O至1L，充分溶解后放置室温备用。
⑺300mM咪唑
NaH2PO4•2H2O 3.9g
NaCl 8.72g
咪唑 1.02g
加ddH2O至500mL，用NaOH调pH至8.0，充分溶解后放置室温备用，其他浓度的咪唑也按比例配置。
⑻封闭液
脱脂奶 5 g
PBS 100 ml
4℃保存。
⑼蛋白running buffer
tris 3 g
Glycine 18.4 g
SDS 1 g
加ddH2O至1L，放于常温备用。
⑽转膜液
蛋白running buffer +20%乙醇（800mL+200mL），4℃保存。
⑾0.01M 的磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4）
NaCl 16g
Na2HPO4•12H2O 7.16g
KCl 0.4 g
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