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指示剂置换法用于生物巯基化合物的检测(3)
向含有1 mL 0.2 M PBS缓冲溶液(pH7.0)、250 µL 1 mM紫脲酸铵溶液(紫红色溶液)和300 µL 1 mM Hg(OAc)2标准溶液依次加入到10 mL离心管中,然后用二次水将溶液定容到8 mL,反应10 min,溶液由紫红色变为浅紫色,逐渐加入1 mM Hcys,待溶液由浅紫色再恢复成紫红色时停止加样,并用二次水定容至10 mL,静置10 min,用紫外-可见分光光度仪进行检测。
4结果与讨论
4.1指示剂置换法用于生物巯基化合物的可视化检测
基于Hg2+和生物巯基化合物的强相互作用检测生物巯基化合物,我们设计了一种简单有效的指示剂置换法。该方法选择合适的指示剂是十分重要的,它必须和受体可逆性结合,并通过紫外光谱上的变化体现出来。本实验方法是基于指示剂——紫脲酸铵和目标物——生物巯基化合物对Hg2+的竞争结合作用而设计的。
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