绞股蓝多糖的结构测定和活性研究(2)
3.3 绞股蓝多糖结构测定结果 13
3.3.1单糖成分分析结果 13
3.3.2甲基化分析结果 14
3.4 活性研究结果 15
3.4.1抗氧化活性测定结果 15
3.4.2抗炎症活性测定结果 16
4 结论 17
致 谢 19
参考文献 20
1 研究背景
1.1 绞股蓝多糖的简介及来源
绞股蓝，又称天堂草、超人参、公罗锅底、遍地生根、七叶胆和七叶参等。主要分布在我国云南、贵州、湖南、湖北、山东等省，喜阴湿温和的气候，多野生在林下、小溪边等荫蔽处。绞股蓝含有80多种人参皂甙，其中11种皂甙是高丽参的3倍，含18种氨 基酸，多种微量元素，丰富的文生素，果酸等。由于绞股蓝草的独特抗病毒，消炎作用及显著的提高机体免疫能力，延长细胞寿命的功能而被人们誉为南人参。绞股蓝富含83种绞股蓝皂甙，为原人参二醇和原人参三醇的异构体，其中有6种人参成分以及多种文生素、氨基酸和人体必需的微量元素。绞股蓝对人体的作用既等同于人参又优于人参，滋补而不燥。系统药理学和临床医学研究证明：绞股蓝具有调节人体生理机能、增强人体体免疫力、消除激素类药物副作用、降血脂、调血压、减肥、抗动脉粥样硬化、抗冠心病、健胃增食、改善睡眠、消除疲劳，乌发养颜等多种神奇保健功能。[1-3]
多糖是绞股蓝中含量比较多的化学成分，绞股蓝叶中多糖含量为1.78%左右，茎中为0.84%左右，绞股蓝茎、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。叶中的游离糖是茎中的2.1倍。粗多糖中总糖含量大于8% 平均回收率为97.2%左右。王昭晶等对碱提绞股蓝水溶性多糖进行了研究，并得到一种粗多糖AGM。AGM为深绿色固体,易溶于水,不溶于乙醇等有机溶剂。经葡聚糖凝胶( G-100)柱层析检测其糖分布情况,表明AGM可能由两种多糖组成,其中一种含有结合蛋白质。而且经高效液相色谱确定了AGM的单糖组成为:鼠李糖∶木糖/岩藻糖(其中至少含有糖或者岩藻糖中的一种)∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳=2.43:1.00:3.02:2.59:3.46。宋淑亮（《绞股蓝多糖的分离纯化及其药理活性研究》，2006山东中医药大学硕士论文 ）对绞股蓝多糖进行了较为系统的研究，共分离出了3种绞股蓝多糖GPS-2,GPS-3和GPS-4，并对其中的两种GPS-2，GPS-3进行了深入的研究，确定了GPS-2的分子量为10700Da， GPS-3的分子量为9 100Da。GPS-2成分中含有鼠李糖和木糖，GPS-3成分中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖和葡萄糖。
1.2 绞股蓝多糖的结构特点
You 等建立了高效液相色谱法测定绞股蓝多糖中单糖组分的分析方法，分析检测使用了C18 反相色谱柱、1- 苯基- 3-甲基吡唑啉酮前置衍生化柱以及紫外检测器，紫外检测波长为250nm。实验表明，绞股蓝多糖是一种典型的混合多糖，它由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，在1mol 绞股蓝多糖中含量分别为16.3，10.3，47.1，5.6，24.0，128.4，25.0，101.4 和71.1μmol 各单糖的加标回收率实验在94.6~108.0%，RSD 低于4.9%。
多糖的生物活性与其结构有紧密的联系。Chi 等[4] 对分离得到的活性多糖进行了形态和结构分析。通过扫描电子显微镜得到了绞股蓝多糖样品的表面形态扫描图片，经过软件分析，发现GPP2a（分离得到的绞股蓝多糖中的一种）由任意分布分散的球状颗粒组成，并且这些小球状颗粒又是由直径500~1000nm 的更小的球状颗粒组成。原子力显微镜得到GPP2a的表面如许多不同大小的云朵，推断这是由不同的多糖链形成的，主链上还有许多高度小于3.98nm的支链，这说明GPP2a 是个多分支的多糖，通过高碘酸氧化、甲基化作用及核磁共振对GPP12a 的结构进行了研究，发现GPP2a 主链是α型1,4位相连接的葡萄糖，有三种支链。由(1→4) 连接的α-D葡萄糖残基构成主链,支链主要(1→6)连接的α-D葡萄糖、(1→3)连接的β-D半乳糖和( 1→6)连接的α-D半乳糖残基,末端为β-D半乳糖残基和β-L阿拉伯糖残基,其结构见图1。