绞股蓝多糖的结构测定和活性研究(4)
1.3.5 抗肝损伤
酒精性肝损伤是典型的肝损伤模型,酒精在进入机体之后,在乙醇脱氢酶催化下,可被脱氢氧化为乙醛和乙酸盐,使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱,从而影响脂肪代谢;同时酒精还能导致细胞基因组DNA断裂,抑制DNA修复酶的功能,引发细胞凋亡等作用。宋淑亮等[13] 通过研究绞股蓝多糖对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用,发现不同浓度的绞股蓝多糖均可以提高损伤后HepG2细胞的存活率,抑制AST、ALT水平的升高,减少MDA 的形成,提高SOD的活性,减少细胞凋亡。
CCl4可以诱导HepG2细胞出现典型的细胞凋亡,研究发现绞股蓝多糖( PGP)对CCl4导致的肝细胞损伤具有显著的保护作用。MTT检测显示PGP保护组细胞的活性明显高于损伤组;流式细胞仪测定细胞的调亡率显示PGP保护组(终浓度为100μg/mL)凋亡率明显低于CCl4损伤组,细胞周期各期细胞分布比例无明显变化[14]。
1.4 绞股蓝多糖的国内外研究概况
结构方面，多糖是绞股蓝中含量比较多的化学成分，对多糖的研究逐渐地引起了人们的关注。王昭晶等［16］对碱提绞股蓝水溶性多糖进行了研究，并得到一种粗多糖AGM。经葡聚糖凝胶( G-100)柱层析检测其糖分布情况,表明AGM 可能由两种多糖组成,其中一种含有结合蛋白质。而且经高效液相色谱确定了AGM 的单糖组成为:鼠李糖∶木糖/岩藻糖(其中至少含有木糖或者岩藻糖中的一种)∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳=2.43:1.00∶3.02:2.59∶3.46。宋淑亮（《绞股蓝多糖的分离纯化及其药理活性研究》，2006山东中医药大学硕士论文 ）对绞股蓝多糖进行了较为系统的研究，共分离出了3种绞股蓝多糖GPS-2,GPS-3和GPS-4，并对其中的两种GPS-2，GPS-3进行了深入的研究，确定了GPS-2的分子量为10 700Da， GPS-3的分子量为9 100Da。GPS-2成分中含有鼠李糖和木糖， GPS-3成分中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖和葡萄糖。
活性方面，从1976 年起,日本学者对绞股蓝进行了大量的药理方面的研究[19-20]。近几年来,国内对绞股蓝的研究也投入了大量的人力和物力。发现它具有多方面的药理作用, 研究表明绞股蓝多糖具有抗肿瘤作用、细胞免疫促进作用、抗氧化作用以及治疗失眠作用等。[21-25]
1.5 本课题的研究意义及研究内容
1.5.1 研究意义
众所周知，化学合成药物具有毒性和副作用，而且在生产过程会造成环境污染，在当今追求环保的趋势下，选择天然药物进行研究具有一定的经济环保价值。
经现代医学研究发现，绞股蓝主要有效成分多糖类，其功效主要是促进人体脂肪类物质代谢、营养人体细胞，同时具有不错的解毒消炎作用，广泛应用于高血脂、脂肪肝、肥胖、便秘、失眠、乙肝、慢性呼吸道炎症（咽喉炎、肠胃炎等）的治疗与保健。临床上主要用于慢性支气管炎，另外也与其它中药配伍，用于降血脂，增强机体免疫和抗癌、防衰老等方面，具有广泛的应用。绞股蓝有重要的药用价值，且我国药源丰富，充分利用开发绞股蓝药品、系列保健品将具有广阔的前景。本文对绞股蓝多糖的结构测定和活性进行研究，为以后绞股蓝多糖的进一步研究和应用提供参考。
1.5.2 研究内容
本论文研究内容包括以下几个方面：
（1）论文标准曲线的建立：葡萄糖标准曲线和蛋白质标准曲线的建立。
（2）绞股蓝多糖提取分离纯化：通过碱提法对绞股蓝进行多糖的提取，再通过DEAE-32离子柱和S400分子筛进行柱层析分离。
（3）绞股蓝多糖结构测定：单糖组成，薄层层析，乙酰化，甲基化。
（4）绞股蓝多糖活性研究：抗氧化活性研究，抗炎活性研究。