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儿茶素类化合物的高效液相色谱分析(5)
茶多酚浸取溶剂主要是水溶液和乙醇溶液。虽然使用乙醇溶液作为浸取溶剂不但具有浸提条件温和,而且还会提高茶多酚浸出率等优点,但是由于乙醇在浸取的过程中易挥发、损失较大,生产成本高,实际的工业生产上一般都采用水溶液作为茶多酚浸取溶剂,本实验参考这一点,从这一点出发同样也以水作为茶多酚的浸取溶剂。
茶叶具有不均匀性和多样性,无论是在茶叶外形颗粒或条索的大小、轻重、粗细、组成比例,还是在内含成分的组成及含量都存在着较大的差别,从而使茶叶中各种成分的浸出特性具有明显的复杂性。因而,研究了解茶叶在浸取过程中内含成分的浸出过程,对浸取作业的工艺技术制订和品质控制,具有十分重要的意义[19]。
实验和分析研究表明,茶叶中内含物浸出一般可分为三个阶段叫[20]:
(1)当溶剂加入到茶叶中时,溶剂首先浸润茶叶并逐渐渗透进入茶叶组织及细胞内部。同时,附着在茶叶表面的可溶性物质逐渐溶解于溶剂中。这一阶段内含物的扩散速率符合零级动力学的方程,即浸出速率与溶质的浓度无关。
(2)由于体系中浓度梯度的存在,从而使茶叶内部(组织和细胞)的溶液由高浓度向茶叶表面低浓度方向的扩散,即溶质的质量传递。这一过程,由于要克服细胞及组织的阻力,因而是限速阶段,并且与浓度梯度有关。因此这一过程内含物浸出速率符合一级动力学方程。
(3)溶质(茶叶中可溶性成分)继续从茶叶表面通过液膜扩散到外部的溶剂中,逐渐地达到浸出平衡。
从茶叶内含物的浸出过程可以发现,内含物从茶叶内部扩散至茶叶表面这一过程是整个浸出的限速阶段,其主要与细胞和组织的阻力以及浓度梯度有关,因此,破坏细胞和组织的结构以及增大浓度梯度则可以有效的促进茶叶可溶物的浸出;同时,由于茶多酚是一类热稳定性差的物质,在温度较高的条件下,易发生氧化反应,从而失去活性,所以在茶叶浸取的时候,不仅要考虑如何有效的将茶多酚从茶叶中浸出,而且还要采取有效的措施阻止或减缓茶多酚在浸取过程的氧化作用。
本章以茶叶中的茶多酚为目标产物,以水作为浸取溶剂,利用最佳条件来提取茶叶中的茶多酚。
2.1 浸提原理
茶多酚的浸出过程是典型的固—液传质过程。在浸出过程中,干燥的茶叶吸收溶剂,溶剂再溶解溶质,最后溶质在进入茶叶细胞内的溶剂中扩散。由于固相颗粒将影响溶剂的浸出过程,而茶叶颗粒并不均匀,因此,为了简化提取过程、提高茶多酚的浸出速率,可以采用如下方法:
(1)降低茶叶颗粒大小,以降低扩散层的厚度,从而增加传质速率;
(2)加快搅拌降低扩散层厚度;
(3)增加溶剂的用量,以降低溶剂中茶多酚的浓度,从而增加传质速率;
2.2 实验仪器与材料
仪器:HH-8数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂);SHB-ⅢS循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);721分光光度计(上海建平
电子
仪器有限公司);高效液相色谱仪(DAD230二极管阵列);KQ118超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司);R-201旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司);电子天平秤;
试剂:抗坏血酸(国药集团化学试剂有限公司);乙醇,磷酸氢二钠、磷酸二氢钾为分析纯;硫酸亚铁、酒石酸钾钠;
实验用茶为南京雨花茶;实验用水为蒸馏水;
2.3 实验方法
2.3.1 标准溶液的配制
1. 酒石酸亚铁溶液:称取l.0g硫酸亚铁和5.0g酒石酸钾钠,用水溶解并定容至lL。
2. pH7.5磷酸盐缓冲溶液:
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