1.3课题研究目的及意义

之所以选择这个课题是因为了解到萱草在近年因其美丽的花和景观作用越来越受市场的欢迎,但经查阅了相关资料后发现：萱草新品种一般通过杂交育种选择抗病、常绿、矮杆及不同花色的杂合一代（F1）申报及审定新品种，由于其后代会出现大量性状分离，萱草一般不通过种子繁殖，而采用分株繁殖的方式。但是每株萱草每年只能繁殖4~5株,难以满足市场的广泛需求，所以为了加快萱草的繁殖速度,本实验以萱草子房为外植体,通过研究不同激素与浓度配比对萱草子房愈伤组织诱导及分化的影响,从而探索出适合萱草子房愈伤组织诱导及分化的最佳培养基。然后通过这些研究为工厂化育苗、快速繁殖提供优化的技术参数或体系,从而为有效解决限制萱草繁殖的瓶颈问题奠定基础。在萱草品种改良的实践中，有时需要改良优良品种的一个或几个性状，如抗病、抗热等。在此过程中，很难通过杂交育种获得，因为每次杂交会引入大量的另一亲本其他基因；遗传转化可以很好的解决该问题。因此，本研究通过采用不同2,4-D浓度对萱草种子愈伤组织诱导、继代及植株再生的影响,从而探索出适合萱草种子愈伤组织诱导及分化的最佳培养基;为我校萱草遗传转化奠定基础。

2以萱草种子为外植体愈伤组织诱导及植株再生

2.1材料与方法

2.1.1试验材料

试验在上海应用技术大学奉贤校区第二学科楼植物组织培养实验室进行，试验材料取自奉贤校区三食堂前面的萱草植株，以萱草种子作为外植体。

2.1.2试验方法

（1）培养基

首先称取4.74g的MS粉和30g蔗糖置于烧杯中，然后用量筒量取1L蒸馏水加入烧杯,之后添加各种激素（NAA、TDZ、2,4-D、和6-BA），然后将烧杯置于磁力搅拌器上，蔗糖和MS粉完全溶解后，利用PH计将pH值调到5.8，添加琼脂7.5g/L，最后在121℃的高压灭菌锅中灭菌2h即可。

（2）外植体消毒取萱草种子作为外植体。首先将萱草种子放于无菌瓶中，在瓶子中加入洗涤剂后，用纱布封住瓶口，然后将瓶子放在自来水下面进行冲洗，持续1h。完成之后在操作台上对外植体进行消毒，用70%的酒精，处理30s，0.1%的升汞消毒10min，最后使用无菌水对种子进行冲洗，一般2~3次即可，在此过程中可以一直晃动瓶子，使外植体可以彻底消毒，最后将消毒完成的种子置于无菌瓶备用即可。

（3）外植体接种接种工作在超净工作台上完成。首先将消毒完成的萱草种子表面的水分用无菌纸吸干，防止污染。然后将种子接种到添加不同浓度植物激素的MS培养基上，置于LED培养室进行暗培养。一段时间后统计观察种子的萌发情况、愈伤组织的诱导及分化情况，当观察到有愈伤组织产生时，将其放在光照下培养，之后计算种子的萌发率、愈伤组织的诱导率以及愈伤组织的分化率。

（4）标准差与显著性差异分析

利用SPSS中的单因素方差分析进行处理，分析不同2,4-D浓度对萱草种子的萌发、愈伤组织的诱导及分化的影响，最终显著性差异用字母a、b、c等标识。