HPLC使用键合型多糖手性柱拆分对映体(7)
最优条件下拆分效果图如下
图5.3 苯丙氨醇最优条件下拆分图谱
5.3备注
在实验中，由于实验样品不稳定，样品存放时间过长等原因，根据实验图谱，推测已产生聚合物，导致色谱图主峰会受到杂峰影响，但是杂峰不影响手性样品的分离。经多次探究及实验尝试，发现在所用色谱柱前串接一根C18柱，可以消除这种影响。特在此作出说明。
未串C18柱前，实验图谱如下
图5.4 未串C18柱前拆分效果图
6 奈必洛尔的结果与讨论
6.1 样品奈必洛尔分离条件对比
6.1.1 不同的流动相配比对其拆分影响
在常温状态22℃下，流速为0.50min/ml，流动相为甲醇和水，在加入0.3%三乙胺的条件下，样品奈必洛尔的拆分情况。
表6.1 在常温22℃条件，样品在不同流动相配比下的实验数据
甲醇：水 保留时间1（min） 保留时间2（min） 理论塔板数1 理论塔板数2 分离度 k1 k2 α
95:5 5.090 5.540 4086 4086 1.22 0.395 0.518 1.313
90:10 6.007 6.833 2826 1748 1.50 0.659 0.887 1.346
85:15 7.717 9.293 1703 1041 1.67 1.144 1.581 1.383
82.5:17.5 9.020 11.187 1296 817 1.69 1.522 2.127 1.398
80:20 10.587 13.593 966 599 1.68 1.957 2.797 1.429
小结：
在常温状态22℃，流速为0.50min/ml，在加入0.3%三三乙胺的条件下，样品奈必洛尔的分离度，随着流动相中甲醇含量的减少而增大。样品在流动相配比甲醇：水82.5:17.5时，分离度最大，达到了1.69。在甲醇:水为80:20，85:15时，分离度达到了1.60左右，但是在这些流动相比例范围左右，样品对流动相组成比较敏感，故选择了甲醇:水为82.5:17.5时为最优流动相配比。
6.1.2 不同三乙胺浓度下，奈必洛尔的分离情况
在常温状态22℃时，流速为0.70min/ml，流动相为甲醇：水为82.5:17.5时，在加入不同量三乙胺的条件下，样品的拆分情况
表6.2 在常温22℃条件下，样品奈必洛尔在加入不同三乙胺浓度下的实验数据
三乙胺含% 保留时间1（min） 保留时间2（min） 理论塔板数1 理论塔板数2 分离度 k1 k2 α
0.1 6.333 7.747 1104 635 1.42 1.467 2.018 1.375
0.2 6.270 7.670 1185 694 1.48 1.443 1.988 1.378
0.3 6.223 7.613 1126 651 1.44 1.421 1.962 1.381