不同提取方法对茶树花多糖性质的影响研究(2)
2．3．5 金属离子螯合能力 9
2．4 茶树花多糖的单糖组成分析 9
3 结论 12
致谢14
参考文献14
图1不同提取法方法对茶树花多糖得率的影响7
图2茶树花多糖的DPPH自由基清除率8
图3茶树花多糖的羟基自由基清除率9
图4茶树花多糖的超氧阴离子自由基清除率9
图5茶树花多糖的ABTS自由基清除率10
图6茶树花多糖的金属离子螯合能力10
图7单糖混标溶液PMP衍生化产物的HPLC色谱图11
图8乙醇回流法(A)、热水浸提法(B)、超声辅助提取法(C)、纤文素酶解法(D)、菠萝蛋白酶解法(E)和中性蛋白酶解法(F)所得多糖样品水解产物PMP衍生化色谱图13
表1不同的酶制剂作用的条件2
表2不同方法提取的茶树花粗多糖的化学组成比较7
表3不同提取方法获得的茶树花多糖的单糖组分摩尔比12
不同提取方法对茶树花多糖性质的影响研究
引言 茶（Camellia sinensis）树的栽培已经有上千年的历史了，通常人们栽培茶树只是为了它的叶片，也就是茶叶，而茶树花和茶树籽作为副产物往往被人们所忽视。茶树花向来拥有 “安全植物的胎盘”以及“茶树上的精华”的美誉[1-7]。许多研究表明，茶树的鲜花与芽叶的主要成分大体相同，富含蛋白质、茶多糖、茶多酚、茶皂素、氨基酸、黄酮类、文生素、微量元素、可可碱和超氧化物歧化酶(SOD)等多种有益成分和活性物质[8,9]。茶树花中氨基酸、咖啡碱、蛋白质、总糖、儿茶素含量较其他花卉高，微量元素钴、锰、铭和烟酸含量也都比较高，茶树花中的蛋白质含量和多糖含量甚至高于茶叶。然而，根据国土资源部2009年的统计数据显示，我国每年可供采摘的茶树花朵的种植面积近两千万亩，重量近4亿公斤，大量的茶树花都因无人理睬而自然脱落，造成了大量的资源浪费。因此茶树花的开发利用是一件很有意义的事。
多糖是指由10个以上的单糖单元通过糖苷键结合的聚合糖高分子碳水化合物。据国内外的研究报道，多糖在临床上具有抗癌、抗病毒、免疫调节、降血糖、抗氧化等功效[11]。茶树花多糖是指从茶树的花朵中所提取出来的多糖成分。与茶多糖相比，关于茶树花多糖的研究甚少，近几年来才有为数不多的研究见刊。韩铨等人研究表明茶树花多糖具有良好的抗肿瘤活性，许人杰等的研究亦表明茶树花多糖抗氧化活性和抗肿瘤效用显著，同时它还具有保肝护肝的作用[12]。
多糖的提取方法多种多样，目前有溶剂提取法、酶制剂提取法、超声辅助提取法、微波辅助提取法以及超临界流体萃取法等[13]。每种方法各有不同，本文主要比较几种常见的提取方法对茶树花多糖性质的影响。
1 材料与方法
1．1 茶树花多糖的提取方法
分别用热水浸提法、乙醇回流法、酶解提取法（分别用纤文素酶，菠萝蛋白酶以及中性蛋白酶处理）和超声波辅助提取法进行茶树花多糖的提取[14]，然后计算得率。
1．1．1 热水浸提法
磨碎茶花粉烘干称取10 g，液料比1 : 25、温度95℃，时间2 h，重复提取2次，合并滤液，10000rad/min离心分离5min取上清，用4倍体积的工业酒精沉淀，离心复溶，浓缩，用8000-14000 KDa的透析袋透析3天，浓缩冻干，可得茶树花粗多糖，称重以计算得率。
1．1．2 乙醇回流法
磨碎茶花粉烘干称取10 g，加80％乙醇400mL，95℃水浴回流1h，趁热抽滤，滤渣用80％热乙醇50mL重复洗涤2次，以除去皂苷、色素和单糖等干扰性成分，滤渣加水250mL，95℃浸提2h，重复提取2次，合并滤液，10000 rad/min离心分离5min，用4倍体积的工业酒精沉淀，离心复溶，浓缩，用8000-14000 KDa的透析袋透析3天，浓缩冻干，可得茶树花粗多糖，称重以计算得率。