取7支干净试管,按下表进行编号并加入试剂。
表1 考马斯亮蓝法测蛋白—标准曲线的制备
试剂
管号    1(空白)    2    3    4    5    6    7
标准蛋白液/mL    -    0.1    0.2    0.3    0.4    0.6    0.8
0.9%NaCl/mL    1.0    0.9    0.8    0.7    0.6    0.4    0.2
考马斯亮蓝染液/mL    4.0    4.0    4.0    4.0    4.0    4.0    4.0
混匀,室温静置3 min,以第一管为空白,于波长595 nm处比色,读取吸光度,以吸光度为纵坐标,各标准液浓度(µg/mL)为横坐标作图得标准曲线。
1.4.7 感官评价
对发酵后的酸奶分别从外观、口感和滋气[5]3个方面进行评定。
2. 结果与讨论
2.1 乳酸菌形态观察及菌落计数
从9组MRS培养基上可观察到的菌落,挑取单菌落进行革兰氏染色[7],镜检后,发现经典老酸奶发酵剂培养基中有A菌、B菌;双歧杆菌发酵剂的培养基中有A菌、B菌;而乳酸菌发酵剂的培养基中只有A菌(图1中最大的为A菌,比A菌略小的为B菌)。
                 
      图1 经典老酸奶中的A菌/B菌                 图2 双歧杆菌中的A菌/B菌

表2  乳酸菌细胞形态,菌落特征
           革 兰 氏             菌 体                  菌 落
菌株      染 色              形 态                  特 征

A          +               短杆状                 菌落较大,透明,灰白色,
                                                       边缘不整齐
    B          +               短杆状                 菌落微小,光滑乳白色,呈水样
                                                      半透明,边缘不整齐,凸起
注:+表示革兰氏染色为阳性
表3 经典老酸奶发酵剂中A菌、B菌含量的测定[11]
菌种                    A                   B
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