定量核磁共振波谱分析中药复方药物(9)
核磁共振仪参数设置为复方中药的最佳测定条件。根据内标峰面积与复方中药中黄芩苷成分的积分面积比值，用2010版中国药典的核磁共振绝对定量法进行计算[23]。同时，通过重复测定，评价了方法的重复性。
2.3 复方中药中盐酸小檗碱类似物的核磁共振定量方法的探索
依照针对复方中药中黄芩苷类似物定量方法的研究过程，本实验还对复方中药中另一类有效成分盐酸小檗碱类似物的定量方法进行了探索。
由于盐酸小檗碱类似物中除了盐酸小檗碱，其他成分含量十分少[31]，故以盐酸小檗碱的含量代替盐酸小檗碱类似物在待测药物中的含量。
采用更换溶剂、沉淀干扰离子等方法，探索提高盐酸小檗碱定量峰信噪比的途径。
3 结果与讨论
3.1 复方中药的核磁共振定量内标物选择的测定
据2.2.2的实验方法，最终选择邻苯二甲酸氢钾作为内标。具体结果与相关讨论如下：
按NMR含量测定的要求(内标法)，内标物应具有较高的纯度，所含质子数较少，主要吸收峰与所测的样品峰之间无干扰，且不与样品发生反应。按照上述要求，经过初步筛选以对苯二甲醛、邻苯二甲酸氢钾作为内标物，分别进行试验。将一清胶囊药粉和内标物称取适量，分别放在不同的核磁管内，加入氘代DMSO测定，并把它们的谱图放在一起比较，判断这二种物质是否适合做一清胶囊的内标来进行定量测定。
对苯二甲醛的出峰位置在10.13ppm和8.05ppm处，该物质在常温下呈白色粉末或晶体状，易于精确称量，且在称量过程中并未出现吸水现象；但对苯二甲醛NMR谱多为芳香质子，与复方中药中黄芩苷和盐酸小檗碱成分中的质子有干扰，影响最终定量结果，故对苯二甲醛不能作为本次实验的内标物。对苯二甲醛的结构及 1H-NMR谱(见图3.1)。
图3.1 对苯二甲醛在溶剂氘代DMSO中的结构及其核磁共振氢谱[22]
图3.2 一清胶囊药粉在溶剂氘代DMSO中的核磁共振氢谱实验图
图3.3 对苯二甲醛与一清胶囊药粉在溶剂氘代DMSO中的核磁共振氢谱实验图
邻苯二甲酸氢钾的出峰位置在8.204ppm和7.529ppm处，该物质为无色单斜结晶或白色结晶性粉末。在空气中稳定,能溶于水，微溶于醇，是常用的基准物质，易于精确称量，且在称量过程中并未出现吸水现象。将该内标加入到一清胶囊药粉中进行定量分析时，邻苯二甲酸氢钾的稳定性也很好，随时间推移，其出峰位置及峰面积都很稳定。邻苯二甲酸氢钾NMR谱多为芳香质子，与复方中药中盐酸小檗碱成分中的质子无干扰，与黄芩苷组分的质子略有干扰，中间没有完全分到基线，但干扰较小，很接近基线，几乎不影响测定结果，本实验不予处理。邻苯二甲酸氢钾的结构及 1H-NMR谱(见图3.4)。
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