双鼠李糖脂对癌细胞的抑制作用的研究(3)
目前国内外的科研工作者发现鼠李糖脂对于一些人体肿瘤细胞的增值具有明显的抑制效果，当这种表面活性剂的浓度为5µg/ml时，这种细胞毒素对Hela癌细胞具有一个显著的抑制作用[16]。鼠李糖脂的这些生物学功能引起了大家的研究兴趣，也使对鼠李糖脂的应用具有了广阔的前景。
1.3.1.4 鼠李糖脂的发酵生产
有实验对鼠李糖脂发酵法生产方面进行了深入的研究，他们的研究工作已经为鼠李糖脂的规模化生产开辟了途径。沈薇[17,18]等对诱变后的铜绿假单胞菌的发酵工艺进行了优化，得到了发酵法生产鼠李糖脂的最佳生产工艺，并对鼠李糖脂发酵动力学进行的探索，为鼠李糖脂在发酵过程控制提供了可靠的依据。范宗忠等[19]对产鼠李糖脂菌株发酵条件进行了研究，通过研究确定了最佳的培养基和培养条件。浦跃武等[20]对微生物发酵生产鼠李糖脂的摇瓶实验研究，得出了摇瓶中高产鼠李糖脂菌株的最佳生产条件。不同的菌株的发酵条件不一样，因此可以在前人工作的基础上找出自筛菌种的最佳的发酵工艺条件。
1.3.1.5 鼠李糖脂的分离纯化
1．鼠李糖脂的分离：根据鼠李糖脂极性，采用适当的有机试剂萃取，浓缩后得到。本实验采用的是用氯仿和甲醇（2:1比例）和发酵液等体积萃取从而得到粗产物
2．鼠李糖脂的纯化：采用硅胶柱层析进行氯仿甲醇混合梯度洗脱或高效液相色谱（HPLC）可以得到高纯度的鼠李糖脂。
1.3.2 其他代谢产物
铜绿假单胞菌的代谢产物还有脂肽和色素，同样这两种物质也具有一定的生物学活性。色素，主要为吩嗪类色素，具有抑制藻类生长等作用，并对原油的降解有影响；脂肽，主要包括脂肽类抗生素和脂肽类表面活性剂，能够起到乳化的作用，另外它还具有抗真菌、抗肿瘤、抗病毒和抗炎症等生物学功能，已引起全世界科学家的重视，并在医药方面展现良好的应用前景。
1.4 结构及性能表征
对纯化的鼠李糖脂进行紫外光谱分析、傅里叶变换红外光谱（FT-IR）分析、液相色谱-质谱联用（LC-MS）、核磁共振(NMR)、扫描电镜(SEM)等方法进行结构表征。
紫外-可见光吸收光谱法是利用某些物质的分子吸收200-800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。通过紫外吸收扫描，可以得知物质的最大吸收波长和吸光度，和标准物质比对后得知取代基团对吸收的影响，红移蓝移等，从而初步确定取代基团的种类，乃至结构。
傅里叶变换红外光谱（FT-IR），它不同于色散型红外分光的原理，是基于对干涉后的红外光进行傅里叶变换的原理而开发的红外光谱仪，主要由红外光源、光阑、干涉仪（分束器、动镜、定镜）、样品室、检测器以及各种红外反射镜、激光器、控制电路板和电源组成。可以对样品进行定性和定量分析，广泛应用于医药化工、地矿、石油、煤炭、环保、海关、宝石鉴定、刑侦鉴定等领域。又因红外吸收带的吸收强度与分子组成或其化学基团的含量有关，故也可用来进行定量分析和化合物纯度鉴定。
液相色谱-质谱联用（LC-MS），结合了液相色谱仪有效分离热不稳性及高沸点化合物的分离能力与质谱仪很强的组分鉴定能力，是一种分离分析复杂有机混合物的有效手段。具有检测过程方便，无须添加离子对试剂，避免了配制离子对流动相的复杂过程；提高了检测灵敏度，大大降低了最低检测限。
核磁共振(NMR)，将样品置于磁场中，用无线电射频脉冲激发样品内氢原子核，引起氢原子核共振，并吸收能量。在停止射频脉冲后，氢原子核按特定频率发出射电信号，并将吸收的能量释放出来，被体外的接受器收录，经电子计算机处理获得图像。当受到强磁场加速的原子束加以一个已知频率的弱振荡磁场时原子核就要吸收某些频率的能量，同时跃迁到较高的磁场亚层中。通过测定原子束在频率逐渐变化的磁场中的强度，就可测定原子核吸收频率的大小。
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