双鼠李糖脂对癌细胞的抑制作用的研究(4)
扫描电镜(SEM)，能够直接观察样品表面，过程简单，可以在样品室中作三度空间的平移和旋转，因此，可以从各种角度对样品进行观察。景深大，图象富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍，比透射电镜大几十倍，并且电子束对样品的损伤与污染程度较小。
1.5 本论文研究内容
经诱变的铜绿假单胞菌M14808（实验室保存），能够产生较大量的鼠李糖脂、脂肽和色素。本论文以鼠李糖脂其中主要是双鼠李糖脂为主要研究对象，研究其代谢产物的抗肿瘤活性，主要包括以下四方面：
1．利用模拟空间环境诱变后的铜绿假单胞菌进行微生物发酵，并分离纯化发酵液，得到鼠李糖脂等代谢产物；
2．通过MTT法研究鼠李糖脂对肿瘤细胞的抑制效果；
3．鼠李糖脂对肿瘤细胞抑制的IC50值及MIC值；
4．初步探讨肿瘤细胞的凋亡机制。
2 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 菌种及肿瘤细胞株
P. aeruginosa M14808，实验室鉴定保藏。
变形杆菌 南京理工大学实验室保存；
大肠杆菌 南京理工大学实验室保存；
金黄色葡萄球菌 南京理工大学实验室保存；
铜绿假单胞菌 南京理工大学实验室保存；
白色念球菌 南京理工大学实验室保存。
MCF-7（人乳腺癌细胞） 南京理工大学实验室保存；
Hep G2（人肝癌组织细胞） 南京理工大学实验室保存；
A549 （人肺腺癌上皮细胞） 南京理工大学实验室保存；
H460 （人非小肺癌细胞） 南京理工大学实验室保存。
2.1.2 主要仪器
本章实验中所需仪器如表1
表1 主要仪器名称、类型和厂家
仪器名称 仪器型号 生产厂家
高速冷冻离心机 Himac CR21G 日本日立公司（HITACHI）
台式离心机 1-15 Sigma
紫外可见分光光度计 Ultrospec 4300 pro Amersham Biosciences
全温度振荡培养箱 QHZ-98A 太仓华美生化仪器厂
恒温培养箱 303A-4 上海锦昱科学仪器有限公司
超低温冰箱 U410-86 New Brunswick Scientific
pH计 PHS-3D 上海精密科学仪器有限公司
微量移液器 1-100μL, 100-1000μL Tomos
托盘扭力天平 TN-100B 上海精密科学仪器有限公司
精密电子天平 JA1003 上海精密科学仪器有限公司
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