四环素对蓝藻的急性毒性研究+实验讨论(12)
测定铜绿微囊藻藻液中四环素含量前，首先配置、测定并绘制四环素液相的标准曲线。取10 mL洁净试管17支，并逐一配置以下浓度四环素标准溶液：100 mg/L、50 mg/L、25 mg/L、10 mg/L、7.5 mg/L、5.0 mg/L、2.5 mg/L、1.0 mg/L、0.75 mg/L、0.50 mg/L、0.25 mg/L、0.10 mg/L、50 μg/L、25 μg/L、10 μg/L、5.0 μg/L、2.5 μg/L。实验时，按浓度从小到大依次进样，分别求出仪器的检测限和四环素液相的标准曲线。
测定铜绿微囊藻藻液中四环素含量时，使用一次性无菌针头抽取约1 mL藻液，经滤头过滤后置于离心管内，进样量为20 μL。
4. 结果与讨论
4.1 铜绿微囊藻细胞数与吸光度的关系
使用紫外可见分光光度计测得藻液吸光度，并使用血球计数板和光学显微镜计量相对应吸光度下铜绿微囊藻细胞的个数，汇总两次实验数据，并筛选。
最终取以下数据：将原藻液稀释100倍得吸光度为0.033，藻密度为7.1×105个/mL；稀释50倍得吸光度为0.042，藻密度为9.5×105个/mL；将原藻液稀释20倍得吸光度为0.134，藻密度为28.9×105个/mL；稀释10倍得吸光度为0.244，藻密度为51.7×105个/mL；将原藻液稀释5倍得吸光度为0.456，藻密度为97.5×105个/mL；而培养基的吸光度0.000，藻密度为0.3×105个/mL。
在Excel中线性拟合后得到数据具有显著地线性相关性。见下图：横坐标为680 nm波长下，铜绿微囊藻的吸光度，纵坐标为藻细胞生物量（单位105个/mL）。
图4-1 吸光度和铜绿微囊藻细胞个数的线性关系
易得680 nm波长下，铜绿微囊藻细胞的吸光度和藻细胞个数的线性关系为：
（4-1）
4.2 生长曲线与抑制率
基于以上实验，我在进行四环素对铜绿微囊藻细胞生长抑制的实验上，将藻细胞接种初始时刻的吸光度值控制为0.065 Abs，即相当于1.41×106个/mL。
实验于每天下午13:00-14:00测定各瓶铜绿微囊藻藻样的吸光度值。
表4-1 铜绿微囊藻藻液吸光度数据
铜绿微囊藻液吸光度数据
NO. c(四) 12/25 12/26 12/27 12/28 12/29 12/30 12/31
Abs Abs Av Abs Av Abs Av Abs Av Abs Av Abs Av
0 0 mg/L 0.065 0.090 0.095 0.113 0.118 0.173 0.168 0.255 0.225 0.339 0.305 0.414 0.359
1 0.109 0.121 0.182 0.232 0.317 0.373
2 0.091 0.124 0.147 0.210 0.283 0.331
3 0.090 0.112 0.168 0.204 0.280 0.316
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