四环素对蓝藻的急性毒性研究+实验讨论(8)
10 mL试管20支
100 mL烧杯4个、250 mL、500 ml烧杯各一个
50 mL、100 mL、250 mL量筒各1个
4 L培养液储备瓶1个
石英比色皿2对
100 μL微量进样针1支
200 μL、1000 μL移液枪头若干
1.5 mL、4.0 mL离心管若干
一次性无菌注射器若干
称量纸、擦镜纸若干
图2-1 实验室部分仪器设备
2.1.3 实验药品
纯水、无水乙醇（分析纯）、甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）。
NaNO3、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O、CaCl2•2H2O、C6H8O7•H2O、C12H22FeN3O14、C10H14N2O8Na2•2H2O、Na2CO3、H3BO3、MnCl2•4H2O、ZnSO4•7H2O、Na2MoO4•2H2O、CuSO4•5H2O、Co(NO3)2•6H2O。以上实验药品均为上海展云化工有限公司的分析纯药品。
2.2 预实验
2.2.1 BG11培养液的配置
本实验所配培养液为BG11培养液，每次配制1瓶（4 L）。
表2-1 配置BG11培养液
编号 成分 化学式 单位含量 含量
1 硝酸钠 NaNO3 1.5 g/L 6.0g
2 磷酸氢二钾 K2HPO4•3H2O 0.04 g/L 0.160g
3 硫酸镁 MgSO4•7H2O 0.075 g/L 0.300g
4 二水合氯化钙 CaCl2•2H2O 0.036 g/L 0.144g
5 柠檬酸 C6H8O7•H2O 0.006 g/L 0.024g
6 柠檬酸铁铵 C12H22FeN3O14 0.006 g/L 0.024g
7 乙二胺四乙酸二钠 C10H14N2O8Na2•2H2O 0.005 g/L 0.02g
8 无水碳酸钠 Na2CO3 0.02 g/L 0.08g
9 A5 1 ml/L 4ml
9-1 硼酸 H3BO3 2.86 g/L 2.86g
9-2 氯化锰 MnCl2•4H2O 1.86 g/L 1.86g
9-3 硫酸锌 ZnSO4•7H2O 0.22 g/L 0.22g
9-4 钼酸钠 Na2MoO4•2H2O 0.39 g/L 0.39g
9-5 硫酸铜 CuSO4•5H2O 0.08 g/L 0.08g
9-6 硝酸钴 Co(NO3)2•6H2O 0.05 g/L 0.05g
上表为BG11培养基配置的具体方法。首先取一洁净的4 L玻璃瓶，加入4 L纯净水（实验采用娃哈哈瓶装纯净水）。随后分别按上表所示在FA1004电子天平上称取硝酸钠6.0g、磷酸氢二钾0.160g、硫酸镁0.300g、二水合氯化钙0.144g、柠檬酸0.024g、柠檬酸铁铵0.024、乙二胺四乙酸二钠0.02、无水碳酸钠0.08g。随后领取一洁净1 L玻璃瓶，按上表9-1～9-6配置微量元素A5一瓶。配置后均需超声溶解并混合均匀。再取1000 μL的Dragonlab TopPette移液枪移取A5液4 mL加入上述4 L的玻璃瓶中。
2.2.2 高压蒸气灭菌
灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。
本实验采用高压蒸气灭菌法。高压蒸气灭菌法是利用适当温度和压力的饱和水蒸气加热杀灭微生物的一种方法。实验采用BXM-30R立式压力蒸汽灭菌锅，对实验所需的培养液（培养基）、以及洁净的容量瓶、三角烧瓶、烧杯、试管等进行灭菌。
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