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四环素对蓝藻的急性毒性研究+实验讨论(7)
1.6.3 饮用水的微囊藻毒素污染
除天然水体及水库源水中普遍检测出MC外,饮用水也存在MC污染。澳大利亚某清澈湖水处理的自来水样品检测出MC(1~23 pg/mL),加拿大Alberta地区某湖来源的自来水样品MC-LR含量在100~1000 pg/mL之间。国内相关研究表明,包括上海、厦门、无锡及昆山在内的部分城市自来水厂出水样品中能检测出MC,部分样品最大浓度接近甚至超过安全限值(1μg/L)。刘天富等测得三门峡市饮用水调蓄池中微囊藻毒素在0.82~957.9 ng/L之间,出水厂为2.7~101.33 ng/L。二次供水的污染情况要大于管网水,重庆涪陵区城乡用水的二次供水中检测出MC最大浓度为0.53 μg/L(2006年9月),8、9、10月份农村井水中MC平均含量为0.48 μg/L。
1.7 课题研究的意义和目的
无论是抗生素还是铜绿微囊藻水华引起的水体污染都是当今水生态环境面临的重要问题,而两者普遍存在于水体中,共存的可能性很大。而关于四环素的急性毒性效应的研究还非常有限,四环素对生态系统的初级生产者——藻类的毒性的研究尚不够多。因此研究四环素类抗生素对铜绿微囊藻的毒性、以及铜绿微囊藻对四环素的降解作用,不仅有助于我们进一步了解四环素类抗生素和铜绿微囊藻的特性,也旨进一步了解并掌握四环素的化学性质及生物有效性,化合物的染毒及抗生素残留分析的方法。这对四环素类抗生素的应用,评价生态风险,减少毒害是十分重要的。因此,选用淡水藻铜绿微囊藻为研究对象,研究四环素对铜绿微囊藻的急性毒性是具有现实意义的。
1.8 课题研究的内容
急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应,甚至引起死亡。藻类是最简单的光合营养有机体,种类繁多,分布很广,是水生生态系统的初级生产者。藻类生长因子包括光照、二氧化碳、适宜的温度、pH值及氮、磷、微量元素等其他营养成分,这些因子的变化会刺激或抑制藻类的生长。在一定环境条件下,如果某种有毒有害的化学物质及其复合污染物进入水体,藻类的生命活动就会受到影响,生物量就会发生改变。所以,通过测定藻类的数量就可以评价有毒有害污染物对藻类生长的影响及对整个水生生态系统的综合环境效应。
本课题将研究:铜绿微囊藻细胞密度与吸光度的关系、铜绿微囊藻生长曲线及抑制率、铜绿微囊藻pH变化规律、考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量、高效液相色谱检测四环素在铜绿微囊藻液中的降解。
2. 实验条件及预实验
2.1 实验条件
2.1.1 实验仪器
BXM-30R立式压力蒸汽灭菌锅(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)
JY96-2N超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)
RJ-TGL-16B高速离心机(无锡瑞江分析仪器有限公司)
FA1004
电子
天平(上海海康电子仪器厂)
PHS-3CpH计(上海佑科仪器仪表有限公司)
超声仪(上海宁商超声仪器有限公司)
TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)
SPX-GB-150光照培养箱(上海博泰实验设备有限公司)
BCD-108S(康佳冷藏冷冻箱)
电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)
Dragonlab TopPette移液枪1000 μL、200 μL
LabTech高效液相色谱仪-UV600紫外可见检测器(北京莱伯泰科仪器有限公司)
0.45µm针头过滤器(郭店桃园医疗化工仪器厂,海宁市)
2.1.2 实验材料
10 mL、25 mL容量瓶各1个
50 mL、100 mL三角烧瓶各15个
250 mL、500 mL三角烧瓶各2个
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