金霉素对蓝藻的急性毒性研究(10)
图4 加入不同浓度金霉素的铜绿微囊藻抑制率柱状图
表4 加入各个浓度金霉素的铜绿微囊藻抑制率
铜绿微囊藻抑制率 24h 48h 72h 96h 120h 144h
1 ppm -0.107249 0.044775 0.027063 0.005859 0.071927 -0.008535
2 ppm -0.090125 0.029910 0.072938 0.142423 0.170827 0.045997
5 ppm -0.060481 0.053491 0.103448 0.138815 0.145333 0.009441
10 ppm 0.063973 0.236245 0.297332 0.335294 0.444459 0.131012
15 ppm 0.047251 0.322378 0.366688 0.414097 0.525489 0.485524
由上表可知：在24h时，浓度较低的几组：1 ppm、2 ppm、5 ppm抑制率都呈负值，说明短时间内低浓度的金霉素对铜绿微囊藻的生长起促进作用。在48 h~144 h之内的所有浓度梯度的铜绿微囊藻的抑制率都逐渐增大，到120 h之时抑制率最大，在144 h抑制率开始减少。其中：1 ppm的最大抑制率为7.1927 % ( 120 h时)；2 ppm的最大抑制率为17.0827% ( 120 h时)；5 ppm的最大抑制率为14.5333% ( 120h时)；10 ppm的最大抑制率为44.4459% ( 120 h时)；15 ppm的最大抑制率为52.5489% ( 120 h时 )。以上数据我们可以看出，加入金霉素的浓度越大，它对铜绿微囊藻细胞的抑制率也越大。此外，本次实验中，无论金霉素浓度多少，抑制率在120 h总是最大的。
图5 96h时的EC50线性拟合方程
EC50，半最大效应浓度( concentration for 50% of maximal effect, EC50 )是指能引起50%最大效应的浓度。它是药物安全性指标。其含义是：引起50%个体有效的剂量扩大多少倍，才会导致50%的个体死亡（或中毒）。此值越大，用药相对越安全。本次实验取96h时加入各个浓度金霉素样液的抑制率作趋势线。由图中公式可以算出，96h EC50=35.11。
4.3 蛋白含量
4.3.1 考马斯亮蓝标准曲线
表5 标准曲线浓度对应吸光度表
标准蛋白质浓度/mol 0 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
吸光度A595 1.718 1.834 1.893 1.92 1.936 1.97 1.984
图6 考马斯亮蓝标准曲线图一
图7 考马斯亮蓝标准曲线图二
4.3.2 铜绿微囊藻蛋白含量
图8 铜绿微囊藻蛋白含量柱状图
我们将测得的吸光度对应图6的标准曲线换算成浓度，作出图8，从蛋白实验的结果来看，微囊藻的蛋白含量呈先增长后逐渐平稳的趋势，第0天到第3天之内，藻细胞浓度显著增大，这是因为藻细胞处于生长期，而第3天到第6天的下降，则是说明了金霉素开始发挥其毒理效应。除空白样外，其他样液蓝藻随着时间逐渐变黄死亡。最后蓝藻各个浓度梯度的蛋白含量几乎相同，整体而言，蛋白含量随着金霉素浓度的增加而降低。
上一篇：车前草总黄酮提取工艺优化