无菌药品生产的清洁验证(12)
色谱条件：检测波长：285nm
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱
流速：1.0mL/min
进样量：20μL
流动相：水：乙腈：三乙胺=60:40:1（用磷酸溶液调解PH至7.0）
●系统适应性的确认方法
取10-5g/ml兰索拉唑溶液，连续进样5针，5次测得的峰面积RSD%应＜2.0％,平均理论塔板数应不低于2000。
●最小检测限度的确认方法：
取兰索拉唑样品制成浓度0.1mg/ml的溶液作为1#母液，每次从上一级母液中精密量取1ml用容量瓶稀释到10ml,并将每次稀释液做一份高效液相图谱，一直稀释到10-8 g/ml不能有效检出为止。
●线性回归的确认方法
根据检测限度值，在10-5g/ml浓度水平，稀释5份溶液做液相色谱图，做图说明在10-5g/ml浓度水平上检测方法具有好的线性。
●回收率的确认方法
准备一块与设备表面材质相同的350mm×350mm的不锈钢。表面以记号笔标出300mm×300mm的区域，并每隔100nm划线，形成9块100mm×100mm的方块。配置浓度为0.009%的兰索拉唑标准溶液，取10ml以喷雾器均匀地喷在300mm×300mm区域内，使单位面积的物质量约为1ppm。自然风干，然后按照实际取样方法随机对其中5个方块进行取样，棉签放入试管，以10ml流动相溶出，送QC检验，计算回收率及回收率的RSD。
表4.3系统适应性的确认
样品1 样品2 样品3 样品4 样品5 平均
峰面积 130982 132750 134627 129598 134584 132508
图4.1 系统适应性确认样品1
图4.2 系统适应性确认样品2
图4.3 系统适应性确认样品3
图4.4 系统适应性确认样品4
图4.5 系统适应性确认样品5
RSD为 1.67% 理论塔板数 2326
相对标准偏差 ×100% (4.2)
理论塔板数公式N =16（tR/w)2 (4.3)
由图谱中可以看出，各样品的保留时间，峰高及大致峰宽≈0.5
样品1：N≈16(6.021/0.5)2=2320
同理可得：样品2：N≈2322，样品3：N≈2333，样品4: N≈2328，样品5：N≈2329
所以系统适应性确认的理论塔板数≈2326
表4.4 最小检测限度的确认
样品1 样品2 样品3 样品4 样品5
配制浓度 1×10-4g/ml 1×10-5g/ml 1×10-6g/ml 1×10-7g/ml 1×10-8g/ml
峰面积 1329571 132704 12737 未检出 未检出
表4.5 线性回归的确认
样品1 样品2 样品3 样品4 样品5
配制浓度 0.6×10-5g/ml 0.8×10-5g/ml 1.0×10-5g/ml 1.2×10-5g/ml 1.4×10-5g/ml