无菌药品生产的清洁验证(9)
⑨ 用经验证的检验方法检验，计算回收率和回收率的RSD。
●擦拭方法及验证
擦拭工具：经过选择的药用棉签
― 耐擦拭萃取溶剂，不脱落纤文，吸附性好，易被湿润，有固定的机械强度
溶剂：溶解残留物，萃取吸附的残留物
― 无残留
― 对检测无干扰
― 高回收率
擦拭操作规程：
― 使残留物的量符合检测方法的线性范围。擦拭面积常取100cm2或25cm2
― 确定药签和擦拭溶剂，规定药签湿润程度。如将药签湿润并在溶剂瓶上挤压至无滴落
― 对方向、力度、路线等需要详细进行规定
― 对照品制备和样品的密封
（2）淋洗液取样方法的验证：
通常淋洗法限度检查不需做回收率验证；定量检查应做回收率验证，可以利用淋洗溶剂冲洗已知量（在限度附近）的分析物确定回收率，回收率通常应不低于95%。根据水流经设备的线路，取样口应选择淋洗线路相对最下游的一个或几个排水口为淋洗的取样口。在进行最后一步结束时的水样时需要按照微生物检验样品和化学检验样品的取样规程收集。样品能够对冲洗液直接进行检测也可对冲洗液做稀释后检测；无论直接检测还是稀释检测都应在拿到样品后首先将样品同空白溶剂做目检，确定是否有颜色差异和异物存在；如果发生以上情况，可直接判定样品不合格。
3.2.2检验方法验证
对用于清洁验证的检验方法的定量要求不必像成品质量检验那样严格。专属性、灵敏度、检测限、精密度、线性范围、回收率试验等都属于检验的验证项目。一般要求线性范围应达到残留物限度的50％至150％；代表精密度的 RSD≤10％；回收率可与取样的回收率有机结合。限度和定量检查是清洗分析方法必须包含于其中的，不同检查方法验证的参数也不相同。
（1）回收率
在取样方法的验证中已经对于回收率的分析方法进行详细描述。
（2）精密度
精密度系指在规定的条件下，从同一个浓度的样品中，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。通常用相对标准偏差(RSD)来表示。定量检查的RSD%应不大于10%。棉签法和淋洗法用于限度检查通常不需要做精密度实验。
（3）线性/范围
线性系指在设计的范围内，检测结果与试样中被测物的浓度(量)直接呈线性比例关系的能力。范围系指能够达到一定的准确度、精密度和线性，测试方法适用的试样中被测物的高、低限浓度或量。清洁验证的分析范围一般来说应该从定量到残留物限度的200％。线性的合格标准应该在方法验证以前予以确定。对于不同的分析方法而言要求也不同。线性的相关系数R2大于0.98，这也可适用于清洁验证。线性实验应该至少有5个浓度水平。每个浓度水平至少平行做两次，通常为三次，越多越好。截距是反映偏差的重要指标。如果截距为0，则说明不存在偏差。如果截距为0或很小，那么化验时就能成功地使用单点校正法进行校正。淋洗法和棉签法用于限度检查时不需做线性/范围验证。
（4）检测限和定量限
检测限系指在确定的试验条件下，试样中被测物能被检测出的最小量，这个通常只需检测出来而不需要准确定量；定量限系指在确定的试验条件下，试样中被测物能被准确测定的最小量，其测定结果应具有一定准确度和精密度。淋洗法和棉签法用于限度检查只需做检测限实验。检测限和定量限是以极限噪音（峰高）为基准，检测限一般定到峰高是噪音的3倍，定量限定到峰高是噪音的10倍。