无菌药品生产的清洁验证(8)
安慰剂取样法相关部门不提倡使用因为无人能确保残留物均匀地遗留在设备整个表面/较大颗粒的残留不能均匀地分散到模拟物料中。
表3.1 清洗检查的取样方法及标准
取样方法 标 准
目检法 无可见的微粒或残留气
棉签擦拭法取样 化学残留物≤ ;或生物活性浓度≤正常治疗剂量的1/1000；微生物计数≤50CFU/棉签
最终冲洗液取样 化学残留物≤ ;或生物活性浓度≤正常治疗剂量的1/1000；微生物计数≤25CFU/ml
3.1.3 活性成分API残留量限度确认
依据药物的生物学活性数据——最低日治疗剂量(minimum treatment daily dosage, MTDD)确定残留物限度是制药企业目前普遍采用的方法。从确保安全的角度出发，一般取最低日治疗剂量的1／1000 为残留物限度的计算出发点.如下表：
表3.2 生物学活性限度——最低日 治疗剂量(MTDD)的 1／1000概念表解
A 产 品 B 产 品 备 注
每日使用l～5 片，每片5mg
最低日治疗剂量：
5mg×l 片=5mg 每日使用2～6 片
每片重0.5g
每日最多使用制剂数为6 片，即3g 最低日剂量l／1000 计算：
5mg／片×1 片×1／1000＝5mg
A 产品为先加工产品，5mg 是成品中主药的含量 B 产品为后续加工产品 应控制的限度：
5μｇ(A)／3g(B)
＝1.7μｇ(A)／g(B)
确保使用产品B时，不出现上批产品的药理作用即是清洁最重要的目的。每天服用产品B越多对身体产生的副作用就越多，因此，上述最低日治疗剂量的l／1000，系即指B产品最多日使用剂数中允许A产品残留的量，不超过因服用B产品而带入人体内的A产品的最低日治疗剂量的l／1000。最低日治疗剂量要依据药品外标签和说明书上的相关数据计算：
MTDD＝每次给药片(粒)数×每片有效成分含量×每日最少给药次数
有人认为，1/1000标准的含义是第一批产品残留在下一产品中的比例控制在1/1000以内；这是错误的。用药安全是制订标准的出发点，1/1000只是计算的基础，实际控制标准与两个药品的使用剂量、下批产品的批量及两个产品生产时共同的接触面积等因素相关。[2]
3.2 清洁分析方法的验证
3.2.1取样方法验证
（1）棉签取样方法的验证：
●取样过程必须经过验证，取样过程的回收率和重现性必须要通过回收率实验验证。通常取样回收率和检验方法回收率要进行综合考量，总回收率一般不低于50%（当然企业可以自行确定标准），多次取样回收率的相对标准偏差RSD应小于等于20%。若回收率＞80为优良，＞50为合理而＜50则视为可疑
●棉签取样过程的验证实际上是对取样棉签、取样人员操作程序、溶剂选择、残留物转移到取样棉签、样品溶出（萃取）过程的一个全面考察。
●验证方法步骤：
① 准备一块与设备表面材质相同的板材，通常选用平整光洁的316L不锈钢板；
② 用记号笔在不锈钢板上划出50mm×50mm 的区域；
③ 将5倍限度量的待测物溶液，定量装入校验的微量注射器；
④ 将溶液尽可能均匀地喷洒在50mm×50mm 的区域内；
⑤ 用电吹风温和地吹干或自然干燥不锈钢板；
⑥ 用选定的溶剂浸湿擦拭棉签，分别从横向纵向两个方向进行擦拭取样。
图3.1 棉签擦拭取样方法示意图
⑦ 必须重复以上程序3次；
⑧ 将擦拭棉签分别放入试管中，加入溶出液10ml进行溶出；